การศึกษาทางแบคทีเรีย การวิจัยทางแบคทีเรีย วิธีการทางแบคทีเรียเพื่อวินิจฉัยโรคติดเชื้อ

เกี่ยวกับบริษัท

คุณไม่พอใจกับคุณภาพของผลิตภัณฑ์ที่มอบให้กับห้องปฏิบัติการหรือไม่? ลองร่วมงานกับเราสิ ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดของเราผลิตขึ้นตามมาตรฐานสากลสูงสุดและมีใบรับรองการจดทะเบียนจากกระทรวงสาธารณสุขของประเทศยูเครน ดูสิ่งนี้ด้วยตัวคุณเอง สั่งซื้อทดลอง.

การศึกษาทางแบคทีเรีย

การวิจัยทางแบคทีเรีย- มีวัตถุประสงค์เพื่อแยกแบคทีเรียและศึกษาคุณสมบัติของแบคทีเรียเพื่อทำการวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา
ควรรวบรวมวัสดุทดสอบภายใต้สภาวะปลอดเชื้อในภาชนะที่ปลอดเชื้อและส่งไปยังห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุด หากจำเป็น ควรเก็บตัวอย่างไว้ในตู้เย็น เทคนิคการเก็บตัวอย่างขึ้นอยู่กับวัตถุ ลักษณะของโรค และคุณสมบัติของจุลินทรีย์ หนึ่งในวิธีทั่วไปในการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาคือการส่องกล้องตรวจแบคทีเรีย
ในการศึกษาแบคทีเรียที่ไม่คงที่ มีการใช้สองวิธี: หยดแบบบด (ระหว่างสไลด์กับกระจกครอบ) และหยดแบบแขวน ควรจำไว้ว่าการเตรียมแบคทีเรียที่ไม่ละลายน้ำนั้นติดเชื้อได้
องค์ประกอบที่สำคัญที่สุดของการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ได้แก่ การฉีดวัคซีนและการเพาะเลี้ยงย่อยของการเพาะเลี้ยงแบคทีเรียโดยใช้ห่วงแบคทีเรียหรือปิเปตของปาสเตอร์ ลูปฆ่าเชื้อโดยการหลอมด้วยเปลวไฟ จากนั้นทำให้เย็นลงโดยการสัมผัสบริเวณวุ้นที่ไม่มีเชื้อหรือล้างด้วยของเหลวฆ่าเชื้อ เมื่อใช้ปิเปตปาสเตอร์ ให้ใช้แหนบหักทิป แล้วส่งปิเปตผ่านเปลวไฟของหัวเผาหลาย ๆ ครั้งแล้วปล่อยให้เย็น เมื่อหยอดเมล็ดจะใช้สารอาหารเหลวและของแข็ง เมื่อหว่านลงบนวุ้นที่เอียง การเพาะเลี้ยงแบคทีเรียจะถูกถูเป็นวงๆ บนพื้นผิวของวุ้น เมื่อหว่านลงในความหนาของคอลัมน์วุ้นหรือเจลาติน สารอาหารจะถูกเจาะที่ด้านล่างของหลอดโดยใช้ห่วงหรือเข็มพิเศษ เมื่อหว่านในอาหารเหลว ต้องใช้ความระมัดระวังเพื่อให้แน่ใจว่าของเหลวไม่หกออกมาและทำให้ขอบของท่อและจุกเปียก ควรทำการฉีดวัคซีนและวัฒนธรรมย่อยใกล้กับเปลวไฟของหัวเผาแก๊ส หลอดทดลองไม่ควรเปิดทิ้งไว้เป็นเวลานาน ปิเปตแบบลูปหรือปาสเตอร์ที่มีวัฒนธรรมไม่ควรสัมผัสสิ่งใด ก่อนปิดหลอดทดลองควรเผาขอบก่อน ต้องติดฉลากหลอดฉีดวัคซีนทันที

วิธีการวิจัยทางจุลชีววิทยาแบ่งออกเป็นวิธีการตรวจหาเชื้อโรคในร่างกายผู้ป่วยโดยตรง - การศึกษาทางแบคทีเรียและแบคทีเรีย วิธีการพิสูจน์ทางอ้อมของการมีอยู่ของเชื้อโรคในร่างกายของผู้ป่วย - การศึกษาทางซีรั่มวิทยาที่มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจหาแอนติเจนจำเพาะในวัสดุที่ติดเชื้อหรือแอนติบอดีในซีรั่มในเลือดและการหลั่งต่างๆของร่างกายผู้ป่วย
การตรวจแบคทีเรียในเลือด, ปัสสาวะ, น้ำไขสันหลัง, เมือกจากลำคอและจมูก, อุจจาระและสารตั้งต้นทางพยาธิวิทยาต่าง ๆ สำหรับการมีเชื้อโรคใช้สำหรับโรคติดเชื้อหลายชนิด วิธีนี้มีการใช้งานค่อนข้างจำกัด แม้ว่าจะมีความสำคัญมากก็ตาม โดยเฉพาะอย่างยิ่งใช้ในการตรวจหาเชื้อโรคมาลาเรีย ไข้กำเริบ และโรคฉี่หนูในเลือด ตรวจน้ำไขสันหลังเพื่อหาเยื่อหุ้มสมองอักเสบที่เป็นหนองและวัณโรค, เมือกจากลำคอและจมูก - สำหรับโรคคอตีบ, โรคหลอดเลือดหัวใจตีบของ Vincent, อุจจาระ - สำหรับโรคอะมีบา, balantidiasis, giardiasis; ปัสสาวะ - สำหรับโรคฉี่หนู กาฬโรคและแบคทีเรียแอนแทรกซ์สามารถเห็นได้ในจุดแยกของบูโบของโรคระบาดและรอยเปื้อนจากเม็ดเลือดแดงของแอนแทรกซ์ กล้องจุลทรรศน์ของ punctate smear จากไขกระดูกและม้ามเม็ดจากแผลสามารถตรวจพบ leishmania; ในเสมหะ - เชื้อมัยโคแบคทีเรียมวัณโรค ข้อดีของวิธีการตรวจแบคทีเรียคือความเร็ว สามารถรับผลการวิเคราะห์ได้ภายในไม่กี่ชั่วโมง ในบางโรค (มาลาเรีย, เยื่อหุ้มสมองอักเสบจากโรคระบาด ฯลฯ ) สามารถตรวจพบเชื้อโรคในร่างกายของผู้ป่วยได้ในวันที่ 1 ของการเจ็บป่วยซึ่งเป็นสิ่งสำคัญมากสำหรับการวินิจฉัยและการรักษาอย่างทันท่วงที ความเป็นไปได้ของการวินิจฉัยแบคทีเรียได้ขยายออกไปอย่างมีนัยสำคัญเนื่องจากการรักษาการเตรียมด้วยซีรั่มเฉพาะที่มีแอนติบอดีต่อเชื้อโรคที่กำหนดซึ่งมีป้ายกำกับด้วยฟลูออโรโครม (วิธีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์) หรือเอนไซม์ (วิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์) ในกรณีนี้ แอนติบอดีที่มีป้ายกำกับจะถูกรวมเข้ากับแอนติเจน ซึ่งตรวจพบโดยใช้วิธีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์ และด้วยวิธีเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ - โดยการย้อมสีผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาของเอนไซม์หลังจากการแนะนำส่วนผสมของสารตั้งต้นและตัวบ่งชี้
วิธีการวินิจฉัยทางแบคทีเรียจะขึ้นอยู่กับการแยกเชื้อโรคออกจากเลือด น้ำไขสันหลัง เสมหะ เมือกจากลำคอและจมูก อุจจาระ ปัสสาวะ น้ำดีของผู้ป่วย และในกรณีเสียชีวิต - จากชิ้นส่วนของอวัยวะที่ได้รับการฉีดวัคซีน บนสื่อสารอาหารพิเศษ การวินิจฉัยทางแบคทีเรียใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาน้ำมูกจากลำคอและจมูกสำหรับแบคทีเรียคอตีบ เพื่อแยกเชื้อโรคของการติดเชื้อในลำไส้ (เช่น อหิวาตกโรค โรคบิด เชื้อ Salmonellosis โรคเอสเชอริจิโอซิส) ออกจากอุจจาระของผู้ป่วย เชื้อโรคปอดบวมจากเสมหะ และในกรณีอื่น ๆ . ในกรณีนี้จะคำนึงถึงลักษณะของการติดเชื้อที่ต้องสงสัยสถานที่ของการเลือกตำแหน่งของเชื้อโรคและเส้นทางของการปล่อยออกสู่สิ่งแวดล้อม การศึกษานี้ให้ผลลัพธ์ที่เป็นบวกในชั่วโมงแรกหรือวันแรกของการเจ็บป่วย อย่างไรก็ตามห้องปฏิบัติการจะรายงานคำตอบสุดท้ายสำหรับโรคติดเชื้อส่วนใหญ่หลังจาก 2-4 วันเท่านั้น และสำหรับโรคแท้งติดต่อและวัณโรค - หลังจาก 3-4 สัปดาห์ ขึ้นอยู่กับระยะเวลาที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์และการจำแนกจุลินทรีย์ (ทางชีวเคมีและซีรัมวิทยา) จุลินทรีย์แต่ละตัวต้องการสารอาหารที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโต ขึ้นอยู่กับว่าจุลินทรีย์ชนิดใดที่ควรแยกออก (ซึ่งถูกกำหนดระหว่างการตรวจทางคลินิกและทางระบาดวิทยาของผู้ป่วย) เลือกสารอาหารที่เหมาะสม บางครั้งการหว่านจะดำเนินการพร้อมกันกับสารอาหารหลายชนิด คุณค่าของผลลัพธ์ของการศึกษาทางแบคทีเรียวิทยาส่วนใหญ่จะถูกกำหนดโดยการนำวัสดุมาจากผู้ป่วยอย่างถูกต้องหรือไม่ และไม่ว่าจะส่งไปยังห้องปฏิบัติการอย่างถูกต้องหรือไม่ วัสดุติดเชื้อจะถูกรวบรวมในภาชนะที่ปลอดเชื้อโดยปฏิบัติตามกฎปลอดเชื้อ

ขั้นตอนที่สำคัญที่สุดของการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาคือการจำแนก- การกำหนดชนิดหรือชนิดของแบคทีเรียที่ได้รับในรูปของการเพาะเลี้ยงบริสุทธิ์ เมื่อระบุแบคทีเรีย จะมีการศึกษาคุณสมบัติทางสรีรวิทยาและชีวเคมีและการก่อตัวของสารพิษ วิธีการทางเซรุ่มวิทยาในการระบุแบคทีเรียมีการใช้กันอย่างแพร่หลาย ในหลายกรณี วิธีการทางชีวภาพในการระบุจุลินทรีย์มีประสิทธิผล โดยขึ้นอยู่กับการติดเชื้อในสัตว์ทดลองด้วยวัสดุที่กำลังศึกษา หรือการเพาะเลี้ยงแบคทีเรียที่เป็นผล และการระบุการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาที่มีลักษณะเฉพาะในสัตว์
วิธีการทางกลและทางชีววิทยาใช้เพื่อแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ ตัวอย่างของวิธีการเชิงกล: หยดวัสดุทดสอบบดด้วยไม้พายหรือห่วงแบคทีเรียที่ปลอดเชื้อแบบเดียวกันบนพื้นผิวของตัวกลางที่มีสารอาหารหนาแน่น ตามลำดับในจานเพาะเชื้อที่หนึ่ง สอง และสาม การแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ออกจากแต่ละโคโลนีที่เติบโต และประกอบด้วยการตรวจและคัดกรองอาหารเลี้ยงเชื้อสด วิธีการทางชีวภาพสำหรับการแยกเชื้อบริสุทธิ์นั้นขึ้นอยู่กับคุณสมบัติอย่างใดอย่างหนึ่งของจุลินทรีย์ที่ถูกแยกออกมา ซึ่งทำให้จุลินทรีย์แตกต่างจากจุลินทรีย์อื่นๆ ที่พบในวัสดุที่กำลังศึกษาอยู่
วิธีการทางชีววิทยาใช้สารอาหารประเภทนี้ซึ่งสร้างสภาวะที่เอื้ออำนวยต่อการพัฒนาจุลินทรีย์บางประเภท วิธีการทางชีวภาพยังรวมถึงการติดเชื้อในสัตว์ทดลองที่มีความไวต่อแบคทีเรียสายพันธุ์ที่แยกได้
การวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาเป็นชุดวิธีการในการระบุจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในผู้ป่วย พาหะ หรือบนวัตถุด้านสิ่งแวดล้อม

การแยกวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์

วิธีการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยากำลังถูกนำมาใช้มากขึ้นในการปฏิบัติเพื่อการตรวจผู้ป่วยโดยละเอียดยิ่งขึ้นโดยสร้างปัจจัยทางสาเหตุของกระบวนการอักเสบกำหนดการบำบัดอย่างมีเหตุผลและกำหนดประสิทธิผล

ความหลากหลายของวัสดุทางคลินิกและเอกลักษณ์ของจุลินทรีย์ในแต่ละอวัยวะจะกำหนดคุณลักษณะของวิธีการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ซึ่งต้องใช้เทคนิคการสุ่มตัวอย่างแบบพิเศษ การฉีดวัคซีนบนตัวกลางสารอาหาร และการวิเคราะห์

การตรวจทางแบคทีเรียของวัสดุทางคลินิกประกอบด้วยหลายขั้นตอน:

การสุ่มตัวอย่างเพื่อการวิจัย

การหว่านบนสื่อธาตุอาหาร

การแยกวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์

การจำแนกและแยกแยะวัฒนธรรมจุลินทรีย์ที่แยกได้

การวิเคราะห์ผลการวิจัย

ในระหว่างการตรวจทางแบคทีเรียสิ่งที่เรียกว่าการหว่านวัสดุที่รวบรวมจากผู้ป่วยจะดำเนินการบนสารอาหารซึ่งส่งเสริมการเจริญเติบโตและการสืบพันธุ์ของสาเหตุที่ทำให้เกิดโรค ในระหว่างการศึกษา ไม่เพียงแต่สามารถระบุข้อเท็จจริงของการมีอยู่เท่านั้น แต่ยังรวมถึงความเข้มข้นของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในวัสดุชีวภาพชนิดใดชนิดหนึ่งด้วย
วิธีตรวจทางแบคทีเรียจะตรวจเสมหะ น้ำไขสันหลัง เลือด ตลอดจนสิ่งคัดหลั่งจากอวัยวะเพศ ช่องปาก คอหอย และบาดแผลของผู้ป่วย ดังนั้นจุลินทรีย์จึงสามารถเพาะได้จากเกือบทุกส่วนของร่างกายมนุษย์
เทคนิคการเพาะเลี้ยงด้วยแบคทีเรียนั้นสะดวกและมีประสิทธิภาพอย่างยิ่งในการตรวจจับและกำหนดประเภทของแบคทีเรียและเชื้อรา การตรวจหาไวรัสทำให้เกิดปัญหาเนื่องจากลักษณะเฉพาะของชีววิทยา
การตรวจทางแบคทีเรีย (การเพาะเลี้ยง) มีความสำคัญอย่างยิ่งไม่เพียง แต่สำหรับการกำหนดชนิดของจุลินทรีย์ที่เฉพาะเจาะจงเท่านั้น แต่ยังรวมถึงการกำหนดระดับความไวของยาปฏิชีวนะบางชนิดด้วย ดังนั้นจึงกำหนดประสิทธิภาพสูงสุดของการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะบางประเภทโดยเฉพาะ
เมื่อทำการวิเคราะห์ สิ่งสำคัญคือต้องจำไว้ว่าจุลินทรีย์บางชนิด เช่น โรคปอดบวม จะตายอย่างรวดเร็วเนื่องจากมีแนวโน้มที่จะทำลายตัวเองเพิ่มขึ้น ดังนั้นการปลูกพืชจึงต้องทำในเวลาอันสั้น

วิธีการวิจัยทางวัฒนธรรม (แบคทีเรีย) เป็นชุดวิธีที่มุ่งเป้าไปที่การแยกและระบุวัฒนธรรมบริสุทธิ์ของจุลินทรีย์ (แบคทีเรีย) โดยใช้การเพาะเลี้ยงบนอาหารเลี้ยงเชื้อ

วัฒนธรรมบริสุทธิ์คือการรวมตัวของจุลินทรีย์ชนิดเดียวกัน ส่วนใหญ่แล้ว การเพาะเลี้ยงที่บริสุทธิ์ได้มาโดยการเลือกและเพาะเลี้ยงอาณานิคมที่แยกได้ (ลูกหลานของเซลล์จุลินทรีย์เซลล์เดียว)

ขั้นตอนของวิธีการ:

1. การรวบรวมวัสดุเพื่อการวิจัย

2. การแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์และการจำแนกวัฒนธรรมบริสุทธิ์

3. บทสรุป.

การรวบรวมวัสดุเพื่อการวิจัยประเภทของวัสดุที่ศึกษาขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการศึกษา (การวินิจฉัย - จากผู้ป่วย การวิเคราะห์ทางระบาดวิทยา - จากสภาพแวดล้อมภายนอก อาหาร ผู้ป่วย และ (หรือ) พาหะของแบคทีเรีย)

การแยกวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์- รวม 3 หรือ 4 ขั้นตอน:

1. การปลูกเชื้อวัสดุ (หลังการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์เบื้องต้น) บนจานที่มีสารอาหารที่เป็นของแข็ง (ควรวินิจฉัยแยกโรคหรือคัดเลือก) เพื่อให้ได้โคโลนีที่แยกได้ ส่วนใหญ่มักเกิดจากการแยกทางกล ในบางกรณี (เช่น เลือด) วัสดุจะถูกฉีดวัคซีนล่วงหน้าลงในอาหารเลี้ยงเชื้อเสริมของเหลว จากนั้นจึงถ่ายโอนไปยังจานที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อ บางครั้งก่อนหยอดเมล็ดจะมีการดำเนินการเลือกสรรวัสดุ (โดยคำนึงถึงคุณสมบัติของจุลินทรีย์ที่แยกได้เช่นการบำบัดด้วยกรดหรือด่างเพื่อแยกแบคทีเรียที่ต้านทาน) เพาะปลูกที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง เวลาในการเพาะปลูกอาจแตกต่างกันไปตามชนิดของแบคทีเรีย

2(3):a) การศึกษาอาณานิคมบนจานวุ้น (ลักษณะทางวัฒนธรรม) การคัดเลือกอาณานิคมที่มีลักษณะเฉพาะที่สุด b) การเตรียมรอยเปื้อนจากอาณานิคมเหล่านี้ด้วยการย้อมสี (แกรมหรือวิธีอื่น) ก) คัดกรองส่วนที่เหลือของโคโลนีที่ศึกษาลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อและเพาะเลี้ยงในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิที่เหมาะสมที่สุด

3(4) ศึกษาความบริสุทธิ์ของวัฒนธรรมที่ได้จากอาหารเลี้ยงเชื้อ ด้วยสิ่งนี้

มีการเตรียมสเมียร์ ย้อมสี (โดยปกติจะมีคราบแกรม) และตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์

ความสม่ำเสมอทางสัณฐานวิทยาและสีเคลือบ (ในมุมมองที่ต่างกัน)

4(5) การระบุวัฒนธรรมบริสุทธิ์

บทสรุป.ขึ้นอยู่กับชุดคุณลักษณะเมื่อเปรียบเทียบกับคุณสมบัติของสายพันธุ์อ้างอิง (ประเภท) ประเภทของจุลินทรีย์ที่แยกได้จากวัสดุจะถูกระบุ

การประเมินวิธีการ:

ข้อดี:ความไวและความแม่นยำค่อนข้างสูงความสามารถในการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์ในวัสดุทดสอบตลอดจนความไวต่อยาปฏิชีวนะ ข้อบกพร่อง:ระยะเวลาสัมพัทธ์ วิธีนี้มีราคาแพง

21. สารอาหารสำหรับแอโรบและแอนแอโรบี ข้อกำหนดสำหรับสารอาหาร การจำแนกประเภท

ความต้องการ:

สื่อต้องมีคุณค่าทางโภชนาการ

จะต้องมีค่า pH ที่แน่นอน

ต้องเป็นไอโซโทนิก เช่น แรงดันออสโมซิสในสิ่งแวดล้อมจะต้องเท่ากันกับในเซลล์

ควรจะชื้นและไม่ไหลมากเกินไป

จะต้องมีศักยภาพรีดอกซ์ที่แน่นอน

จะต้องผ่านการฆ่าเชื้อ

จะต้องรวมเป็นหนึ่งเดียวกันนั่นคือ มีส่วนผสมแต่ละอย่างในปริมาณคงที่

สื่อสารอาหารสามารถแบ่งออกได้:

ก) โดยกำเนิด:

1) จากธรรมชาติ - ผลิตภัณฑ์อาหารจากธรรมชาติ (เนื้อสัตว์ นม มันฝรั่ง)

2) เทียม - จัดทำขึ้นโดยเฉพาะสำหรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์: - อาหารจากผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ (น้ำเนื้อ, น้ำซุปสกัดจากเนื้อสัตว์ (MPB), วุ้นสกัดจากเนื้อสัตว์ (MPA), - ไม่มีองค์ประกอบคงที่ - สื่อสารอาหารสังเคราะห์ - สารละลายอย่างเคร่งครัด ปริมาณเกลือ, กรดอะมิโน, เบสไนโตรเจน, วิตามินในน้ำกลั่นที่กำหนด - มีองค์ประกอบคงที่, ใช้สำหรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์และการเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อรับวัคซีน, เซรั่มภูมิคุ้มกันและยาปฏิชีวนะ

B) ตามวัตถุประสงค์:

1) วัตถุประสงค์ทั่วไป (MPB, MPA) - จุลินทรีย์ส่วนใหญ่เติบโตบนพวกมัน

2) คัดเลือก - คัดเลือกส่งเสริมการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ประเภทหนึ่งจากส่วนผสม (เช่นวุ้นไข่แดงเกลือสำหรับเชื้อ Staphylococci)

3) การวินิจฉัยแยกโรค - อนุญาตให้จุลินทรีย์ประเภทหนึ่งแตกต่างจากจุลินทรีย์ชนิดอื่นโดยการปรากฏตัวของสื่อ (เช่น Endo สภาพแวดล้อมของ Levin สำหรับกลุ่มจุลินทรีย์ในลำไส้)

นอกจากนี้ขึ้นอยู่กับ วัตถุประสงค์การใช้งานในโครงการแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ สื่อต่อไปนี้สามารถแยกแยะได้ตามวัตถุประสงค์:

1) การเสริมคุณค่า - ยับยั้งการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่มาพร้อมกับเชื้อโรค

2) เพื่อให้ได้อาณานิคมที่แยกได้

3) การสะสมวัฒนธรรมบริสุทธิ์

B) ด้วยความสม่ำเสมอ:

1) ของเหลว;

2) ของเหลวกึ่ง (โดยเติมวุ้นวุ้นที่ความเข้มข้น 0.5-0.7%);

3) หนาแน่น - สูงกว่า 1%

วิธีการวิจัยทางแบคทีเรีย (BLMI)– วิธีการที่ใช้การแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ของแบคทีเรียโดยใช้การเพาะเลี้ยงโดยใช้สารอาหารและการจำแนกสายพันธุ์โดยอาศัยการศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยา วัฒนธรรม ชีวเคมี พันธุกรรม ซีรั่มวิทยา ชีวภาพ และสิ่งแวดล้อมของจุลินทรีย์

การวินิจฉัยการติดเชื้อทางแบคทีเรียดำเนินการโดยใช้แผนการวินิจฉัยมาตรฐานที่ได้รับอนุมัติจากกระทรวงสาธารณสุข

วัฒนธรรมบริสุทธิ์ –แบคทีเรียชนิดหนึ่งที่ปลูกบนสารอาหารซึ่งคุณสมบัติอยู่ระหว่างการศึกษา

ความเครียด– การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์บริสุทธิ์ที่ระบุชนิดได้ ซึ่งแยกได้จากแหล่งเฉพาะในเวลาที่กำหนด สายพันธุ์ของสายพันธุ์เดียวกันอาจแตกต่างกันเล็กน้อยในด้านคุณสมบัติทางชีวเคมี พันธุกรรม ซีรั่มวิทยา ชีวภาพ และคุณสมบัติอื่น ๆ รวมถึงสถานที่และเวลาในการแยกตัว

เป้าหมายของ BLMI:

1. ทำการวินิจฉัยสาเหตุ: การแยกเชื้อจุลินทรีย์บริสุทธิ์และระบุมัน

2. การกำหนดคุณสมบัติเพิ่มเติม เช่น ความไวของจุลินทรีย์ต่อยาปฏิชีวนะและแบคทีเรีย

3. การกำหนดจำนวนจุลินทรีย์ (สำคัญในการวินิจฉัยการติดเชื้อที่เกิดจาก UPM)

4. ประเภทของจุลินทรีย์ เช่น การหาความแตกต่างภายในความจำเพาะจากการศึกษา ทางพันธุกรรมและ ระบาดวิทยา(ฟาโกวาร์และเซโรวาร์) เครื่องหมายสิ่งนี้ใช้เพื่อวัตถุประสงค์ทางระบาดวิทยา เนื่องจากทำให้สามารถสร้างความเหมือนกันของจุลินทรีย์ที่แยกได้จากผู้ป่วยที่แตกต่างกันและจากวัตถุด้านสิ่งแวดล้อมที่แตกต่างกันในโรงพยาบาลและภูมิภาคที่แตกต่างกัน

BLMI มีหลายขั้นตอนแตกต่างกันสำหรับแอโรบี, แอนแอโรบีเชิงปัญญา และแอนแอโรบีบังคับ

I. ขั้นตอนของ BLMI ในการแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ของแอโรบีและแอนแอโรบี

เวที.

ก. การรวบรวม การขนส่ง การเก็บรักษา การประมวลผลเบื้องต้นของวัสดุบางครั้งก่อนที่จะหยอดเมล็ดจะมีการดำเนินการคัดเลือกวัสดุโดยคำนึงถึงคุณสมบัติของจุลินทรีย์ที่แยกได้ ตัวอย่างเช่น ก่อนที่จะตรวจเสมหะหรือวัสดุอื่นๆ ว่ามีเชื้อมัยโคแบคทีเรียมวัณโรคที่เป็นกรดอยู่หรือไม่ วัสดุนั้นจะได้รับการบำบัดด้วยสารละลายกรดหรือด่าง

B. การหว่านในสื่อเสริมคุณค่า(ถ้าจำเป็น) จะดำเนินการหากวัสดุทดสอบมีแบคทีเรียจำนวนเล็กน้อย เช่น เมื่อแยกวัฒนธรรมของเลือด ในการทำเช่นนี้ เลือดที่ถ่ายเมื่อมีไข้ในปริมาณมาก (8-10 มล. ในผู้ใหญ่, 4-5 มล. ในเด็ก) จะถูกฉีดเข้าไปในอาหารเลี้ยงเชื้อในอัตราส่วน 1:10 (เพื่อเอาชนะผลของเลือดฆ่าเชื้อแบคทีเรีย ปัจจัย); ฟักพืชที่อุณหภูมิ 37 0 C เป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง

B. กล้องจุลทรรศน์ของวัสดุที่กำลังศึกษาเตรียมสเมียร์จากวัสดุที่ตรวจสอบ ย้อมด้วยแกรมหรือวิธีอื่น แล้วตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ มีการประเมินจุลินทรีย์ที่มีอยู่และปริมาณของมัน การศึกษาเพิ่มเติมควรแยกจุลินทรีย์ที่มีอยู่ในสเมียร์เริ่มแรก

D. การหว่านบนอาหารเพื่อให้ได้โคโลนีที่แยกได้วัสดุถูกฉีดวัคซีนด้วยห่วงหรือไม้พายโดยใช้วิธีการแยกเชิงกลลงบนจานที่มีตัวกลางในการวินิจฉัยแยกโรคหรือคัดเลือกเพื่อให้ได้โคโลนีที่แยกได้ หลังจากหยอดเมล็ด ถ้วยจะคว่ำลง (เพื่อหลีกเลี่ยงไม่ให้โคโลนีเปื้อนด้วยหยดของเหลวที่ควบแน่น) ติดป้ายกำกับและวางไว้ในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ 37 0 C เป็นเวลา 18-24 ชั่วโมง

ควรจำไว้ว่าเมื่อหว่านและเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ใหม่ ควรให้ความสนใจของคนงานในการปฏิบัติตามกฎของการติดเชื้อเพื่อป้องกันการปนเปื้อนของสารอาหารและป้องกันการติดเชื้อของผู้อื่นและการติดเชื้อในตัวเอง!

ในกรณีของการติดเชื้อที่เกิดจากจุลินทรีย์ฉวยโอกาส ซึ่งจำนวนจุลินทรีย์ที่มีอยู่ในวัสดุทางพยาธิวิทยาเป็นสิ่งสำคัญ ให้ทำการเพาะวัสดุในเชิงปริมาณ โดยจะมีการเจือจางวัสดุ 100 เท่าหลายครั้ง (ปกติ 3 การเจือจาง) ใน เตรียมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ไอโซโทนิกปลอดเชื้อในหลอดทดลองก่อน หลังจากนั้น 50 ไมโครลิตรของการเจือจางแต่ละครั้งจะถูกหว่านลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อในจานเพาะเชื้อ

เวที.

ก. การศึกษาสัณฐานวิทยาของโคโลนีบนตัวกลางด้วยกล้องจุลทรรศน์พวกเขามองผ่านจานและจดบันทึกสารอาหารที่เหมาะสม อัตราการเจริญเติบโต และรูปแบบการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ เลือกเรียนได้เลย อาณานิคมที่แยกได้ตั้งอยู่ตามแนวจังหวะใกล้กับศูนย์กลางมากขึ้นหากโคโลนีหลายประเภทเติบโตขึ้น แต่ละโคโลนีจะถูกตรวจสอบแยกกัน มีการประเมินสัญญาณของอาณานิคม (ตารางที่ 7) หากจำเป็น ให้มองอาหารที่มีพืชผลผ่านแว่นขยายหรือใช้กล้องจุลทรรศน์ที่มีเลนส์กำลังขยายต่ำและไดอะแฟรมแคบ มีการศึกษาคุณสมบัติของสีย้อมของ morphotypes ต่าง ๆ ของอาณานิคมด้วยเหตุนี้จึงมีการเตรียมส่วนหนึ่งของอาณานิคมที่อยู่ระหว่างการศึกษา ละเลง,ย้อมด้วยแกรมหรือวิธีอื่นด้วยกล้องจุลทรรศน์และกำหนดสัณฐานวิทยาและความบริสุทธิ์ของวัฒนธรรม หากจำเป็นให้ใส่ RA โดยประมาณบนกระจกด้วยเซรั่มโพลีวาเลนต์

ข. การสะสมวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์เพื่อสะสมวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ โคโลนีที่แยกได้ของ morphotypes ทั้งหมดจะถูกเพาะใหม่ในหลอดแยกกันด้วยวุ้นเอียงหรือสารอาหารอื่น ๆ และบ่มในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิ +37 0 C (อุณหภูมินี้เหมาะสมที่สุดสำหรับจุลินทรีย์ส่วนใหญ่ แต่อาจแตกต่างกันสำหรับ ตัวอย่าง, แคมไพโลแบคทีเรียม เอสพีพี.– +42 0 องศาเซลเซียส แคนดิดา เอสพีพี. และเยอร์ซิเนีย เพสติส– +25 0 องศาเซลเซียส)

สื่อของ Kligler มักใช้เป็นสื่อสะสมสำหรับ enterobacteria

องค์ประกอบของอาหารกลางของ Kligler: MPA, กลูโคส 0.1%, แลคโตส 1%, รีเอเจนต์ไฮโดรเจนซัลไฟด์ (เฟอรัสซัลเฟต + โซเดียมไธโอซัลเฟต + โซเดียมซัลไฟต์), ตัวบ่งชี้สีแดงฟีนอล สีเริ่มต้นของตัวกลางคือสีแดงเข้ม ตัวกลางจะ "ลาด" ในหลอดทดลอง: มีคอลัมน์ (2/3) และพื้นผิวเอียง (1/3)

การหว่านในอาหารของ Kligler ทำได้โดยการลากผ่านพื้นผิวแล้วแทงเข้าไปในเสา

เวที.

ก. การบัญชีการเจริญเติบโตบนสื่อสะสม การประเมินความบริสุทธิ์ของวัฒนธรรมในแกรมสเมียร์ หมายเหตุ รูปแบบการเจริญเติบโตวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ที่แยกจากกัน วัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ทางสายตามีลักษณะเฉพาะคือการเติบโตที่สม่ำเสมอ ที่ การตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์สเมียร์สีที่เตรียมจากการเพาะเลี้ยงดังกล่าวเผยให้เห็นเซลล์เนื้อเดียวกันทั้งทางสัณฐานวิทยาและสีดีบุกในมุมมองที่ต่างกัน อย่างไรก็ตาม ในกรณีของภาวะเยื่อหุ้มเซลล์ที่เด่นชัดซึ่งมีอยู่ในแบคทีเรียบางประเภท สเมียร์จากวัฒนธรรมบริสุทธิ์อาจมีเซลล์ที่มีสัณฐานวิทยาต่างกันไปพร้อมกัน

หากใช้สื่อบ่งชี้ของ Kligler เป็นสื่อในการสะสม จะมีการประเมินการเปลี่ยนแปลงของสีในคอลัมน์และส่วนที่เอียงซึ่งใช้ในการกำหนดคุณสมบัติทางชีวเคมี: การหมักกลูโคส การผลิตแลคโตสและไฮโดรเจนซัลไฟด์ เมื่อแลคโตสสลายตัว ส่วนเอียงของตัวกลางจะเปลี่ยนเป็นสีเหลือง และเมื่อกลูโคสสลายตัว คอลัมน์จะเปลี่ยนเป็นสีเหลือง เมื่อ CO 2 เกิดขึ้นระหว่างการสลายตัวของน้ำตาล จะเกิดฟองก๊าซหรือการแตกของคอลัมน์ ในกรณีของการผลิตไฮโดรเจนซัลไฟด์ จะเกิดสีดำขึ้นตามเส้นทางการฉีดเนื่องจากการเปลี่ยนเฟอร์รัสซัลเฟตเป็นเฟอร์รัสซัลไฟด์

ธรรมชาติของการเปลี่ยนสีในตัวกลางของ Kligler (รูปที่ 23) อธิบายได้จากความเข้มไม่เท่ากันของการสลายสารไนโตรเจนโดยจุลินทรีย์และการก่อตัวของผลิตภัณฑ์อัลคาไลน์ในสภาวะแบบแอโรบิก (บนพื้นผิวเอียง) และแบบไม่ใช้ออกซิเจน (ในคอลัมน์) .

ภายใต้สภาวะแอโรบิก การก่อตัวของอัลคาไลที่รุนแรงจะเกิดขึ้นบนพื้นผิวที่เอียงมากกว่าในคอลัมน์ของตัวกลาง ดังนั้นในระหว่างการสลายตัวของกลูโคสซึ่งมีอยู่ในตัวกลางในปริมาณเล็กน้อย กรดที่เกิดขึ้นบนพื้นผิวที่เอียงจะถูกทำให้เป็นกลางอย่างรวดเร็ว ในเวลาเดียวกัน ในระหว่างการสลายตัวของแลคโตสซึ่งมีความเข้มข้นสูงในตัวกลาง ผลิตภัณฑ์ที่เป็นด่างจะไม่สามารถทำให้กรดเป็นกลางได้

ภายใต้สภาวะไร้ออกซิเจนในคอลัมน์ ผลิตภัณฑ์ที่เป็นด่างจะเกิดขึ้นในปริมาณเล็กน้อย ดังนั้นจึงตรวจพบการหมักกลูโคสที่นี่

ข้าว. 23.สื่อตัวบ่งชี้ Kligler:

1 – เริ่มต้น,

2 – ด้วยการเติบโต อีโคไล

3– ด้วยการเติบโต ส. พาราตีฟี บี,

4 – ด้วยการเติบโต ส. ไทฟี

อี. โคไลสลายกลูโคสและแลคโตสด้วยการก่อตัวของก๊าซไม่สร้างไฮโดรเจนซัลไฟด์ พวกมันทำให้เกิดสีเหลืองของคอลัมน์และส่วนที่เอียงโดยมีการแตกหักในตัวกลาง

ส. พาราตีฟีสลายกลูโคสด้วยการก่อตัวของก๊าซแลคโตสเป็นลบ พวกมันทำให้คอลัมน์เป็นสีเหลืองโดยมีการแตกส่วนที่เอียงไม่เปลี่ยนสีและยังคงเป็นสีแดงเข้ม โดยที่ ส. พาราติฟี บีผลิตไฮโดรเจนซัลไฟด์ (สีดำปรากฏขึ้นเมื่อการฉีดดำเนินไป) ส. ปราติฟี เอไม่ผลิตไฮโดรเจนซัลไฟด์

ส. ไทฟีสลายกลูโคสโดยไม่มีการเกิดก๊าซ มีแลคโตสเป็นลบ เกิดไฮโดรเจนซัลไฟด์ ทำให้คอลัมน์เปลี่ยนเป็นสีเหลืองโดยไม่มีการแตกหัก ส่วนที่เอียงไม่เปลี่ยนสีและยังคงเป็นสีแดงเข้ม และสีดำจะปรากฏขึ้นเมื่อการฉีดดำเนินไป

ชิเจลล่า เอสพีพี.กลูโคสบวก แลคโตสลบ ไม่สร้างไฮโดรเจนซัลไฟด์ ทำให้คอลัมน์เปลี่ยนเป็นสีเหลือง (มีหรือไม่มีตัวแบ่งขึ้นอยู่กับเซโรวาร์) ส่วนที่เอียงไม่เปลี่ยนสีและยังคงเป็นสีแดงเข้ม

B. การระบุวัฒนธรรมบริสุทธิ์ขั้นสุดท้าย(การกำหนดตำแหน่งอย่างเป็นระบบของจุลินทรีย์ที่แยกได้จนถึงระดับชนิดหรือตัวแปร) และกำหนดสเปกตรัมของความไวของวัฒนธรรมที่แยกได้ต่อยาปฏิชีวนะ

เพื่อระบุวัฒนธรรมบริสุทธิ์ มีการศึกษาลักษณะทางชีวเคมี พันธุกรรม ซีรั่มวิทยา และชีวภาพในขั้นตอนนี้ (ตารางที่ 8)

ในการปฏิบัติงานประจำในห้องปฏิบัติการ ในระหว่างการระบุตัวตน ไม่จำเป็นต้องศึกษาคุณสมบัติทั้งหมด ใช้การทดสอบง่ายๆ ที่ให้ข้อมูล เข้าถึงได้ และเพียงพอเพื่อระบุชนิด (ตัวแปร) ของจุลินทรีย์ที่แยกได้

การวิจัยทางแบคทีเรียเป็นการศึกษาที่ออกแบบมาเพื่อแยกและศึกษาคุณสมบัติเพื่อทำการวินิจฉัยทางจุลชีววิทยา

ควรรวบรวมวัสดุทดสอบภายใต้สภาวะปลอดเชื้อในภาชนะที่ปลอดเชื้อและส่งไปยังห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุด หากจำเป็น ควรเก็บตัวอย่างไว้ในตู้เย็น เทคนิคการเก็บตัวอย่างขึ้นอยู่กับวัตถุ ลักษณะของโรค และคุณสมบัติของจุลินทรีย์ หนึ่งในวิธีทั่วไปในการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาคือการส่องกล้องตรวจแบคทีเรีย

ในการศึกษาแบคทีเรียที่ไม่คงที่ มีการใช้สองวิธี: หยดแบบบด (ระหว่างกระจกสไลด์และฝาครอบ) และ ควรจำไว้ว่าการเตรียมแบคทีเรียที่ไม่ละลายน้ำนั้นติดเชื้อได้

สำหรับการตรวจแบคทีเรียในการเตรียมแบบตายตัวจะใช้สเมียร์ เพื่อเตรียมความพร้อม หยดของเหลวทดสอบจะถูกกระจายไปบนพื้นผิวของกระจกสไลด์แล้วจึงทำให้แห้ง วิธีแก้ไขยาที่พบบ่อยที่สุดคือส่งผ่านเปลวไฟของเตาแก๊ส ในบางกรณีจะใช้สารยึดติด การเตรียมการแบบตายตัวมักจะเปื้อน (ดูการย้อมสีของจุลินทรีย์) องค์ประกอบที่สำคัญที่สุดของการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ได้แก่ การฉีดวัคซีนและการเพาะเลี้ยงย่อยโดยใช้ห่วงแบคทีเรียหรือปิเปตของปาสเตอร์ ลูปฆ่าเชื้อโดยการหลอมด้วยเปลวไฟ จากนั้นทำให้เย็นลงโดยการสัมผัสบริเวณวุ้นที่ไม่มีเชื้อหรือล้างด้วยของเหลวฆ่าเชื้อ เมื่อใช้ปิเปตปาสเตอร์ ให้ใช้แหนบหักทิป แล้วส่งปิเปตผ่านเปลวไฟของหัวเผาหลาย ๆ ครั้งแล้วปล่อยให้เย็น เมื่อหยอดเมล็ดจะใช้สารอาหารเหลวและของแข็ง เมื่อหว่านลงบนวุ้นที่เอียง การเพาะเลี้ยงแบคทีเรียจะถูกถูเป็นวงๆ บนพื้นผิวของวุ้น เมื่อหว่านลงในความหนาของคอลัมน์วุ้นหรือเจลาติน สารอาหารจะถูกเจาะที่ด้านล่างของหลอดโดยใช้ห่วงหรือเข็มพิเศษ เมื่อหว่านในอาหารเหลว ต้องใช้ความระมัดระวังเพื่อให้แน่ใจว่าของเหลวไม่หกออกมาและทำให้ขอบของท่อและจุกเปียก ควรทำการฉีดวัคซีนและวัฒนธรรมย่อยใกล้กับเปลวไฟของหัวเผาแก๊ส หลอดทดลองไม่ควรเปิดทิ้งไว้เป็นเวลานาน ปิเปตแบบลูปหรือปาสเตอร์ที่มีวัฒนธรรมไม่ควรสัมผัสสิ่งใด ก่อนปิดหลอดทดลองควรเผาขอบก่อน ต้องติดฉลากหลอดฉีดวัคซีนทันที

ขั้นตอนที่สำคัญที่สุดของการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาคือการจำแนก - การกำหนดชนิดหรือชนิดของแบคทีเรียที่ได้รับในรูปแบบของวัฒนธรรมบริสุทธิ์ เมื่อระบุแบคทีเรีย จะมีการศึกษาคุณสมบัติทางสรีรวิทยาและชีวเคมีและการก่อตัวของสารพิษ วิธีการทางเซรุ่มวิทยาในการระบุแบคทีเรีย (ปฏิกิริยาและ) มีการใช้กันอย่างแพร่หลาย ในหลายกรณี วิธีการทางชีวภาพในการระบุจุลินทรีย์มีประสิทธิผล โดยขึ้นอยู่กับการติดเชื้อในสัตว์ทดลองด้วยวัสดุที่กำลังศึกษา หรือการเพาะเลี้ยงแบคทีเรียที่เป็นผล และการระบุการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาที่มีลักษณะเฉพาะในสัตว์

วิธีการทางกลและทางชีววิทยาใช้เพื่อแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ ตัวอย่างของวิธีการทางกล: หยดวัสดุทดสอบบดด้วยไม้พายหรือห่วงแบคทีเรียที่ปลอดเชื้อแบบเดียวกันบนพื้นผิวของตัวกลางที่มีสารอาหารหนาแน่น ตามลำดับในตัวแรก ตัวที่สอง และตัวที่สาม การแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ออกจากแต่ละโคโลนีที่เติบโต และประกอบด้วยการตรวจและคัดกรองอาหารเลี้ยงเชื้อสด วิธีการทางชีวภาพสำหรับการแยกเชื้อบริสุทธิ์นั้นขึ้นอยู่กับคุณสมบัติอย่างใดอย่างหนึ่งของจุลินทรีย์ที่ถูกแยกออกมา ซึ่งทำให้จุลินทรีย์แตกต่างจากจุลินทรีย์อื่นๆ ที่พบในวัสดุที่กำลังศึกษาอยู่

วิธีการทางชีววิทยาใช้สารอาหารประเภทนี้ซึ่งสร้างสภาวะที่เอื้ออำนวยต่อการพัฒนาจุลินทรีย์บางประเภท วิธีการทางชีวภาพยังรวมถึงการติดเชื้อในสัตว์ทดลองที่มีความไวต่อแบคทีเรียสายพันธุ์ที่แยกได้

การวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาเป็นชุดวิธีการในการระบุจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในผู้ป่วย พาหะ หรือบนวัตถุด้านสิ่งแวดล้อม การศึกษาทางแบคทีเรียยังใช้ในการตรวจหาจุลินทรีย์ฉวยโอกาสและสุขอนามัยที่บ่งชี้ถึงระดับมลพิษของสภาพแวดล้อมภายนอก เพื่อศึกษาภูมิทัศน์ของจุลินทรีย์ในสภาพแวดล้อม (วัตถุ) บางอย่าง การวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาสามารถนำมาใช้เพื่อการวินิจฉัย การป้องกันโรคติดเชื้อ สำหรับลักษณะสุขอนามัยและสุขอนามัยของสภาพแวดล้อมของมนุษย์ สำหรับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์

วัสดุและวิธีการในการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยาขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการวิเคราะห์ สภาพแวดล้อม การเกิดโรค และระยะของโรค หากมีแบคทีเรียในเลือด ตรวจพบจุลินทรีย์โดยใช้การเพาะเลี้ยงเลือด ในกรณีที่มีรอยโรคในท้องถิ่นที่เด่นชัดควรมองหาเชื้อโรคในการขับถ่ายหรือการหลั่งของอวัยวะที่ได้รับผลกระทบ (โรคคอตีบ โรคบิด โรคหนองใน ฯลฯ ) ในที่สุดในโรคที่มีความซับซ้อนเมื่อ (เช่นในไข้ไทฟอยด์) แบคทีเรียถูกแทนที่ด้วยรอยโรคในลำไส้เล็กจะใช้วิธีการวิจัยที่เหมาะสมในแต่ละขั้นตอน: ในช่วงสัปดาห์แรกของโรควัฒนธรรมเลือด จะดำเนินการในการทดสอบทางซีรัมวิทยาที่น่าเชื่อถือที่สุดครั้งที่สองโดยเริ่มจากในสัปดาห์ที่สามผลลัพธ์ที่เป็นบวกจะได้รับจากการเพาะเลี้ยงอุจจาระ วิธีหลังยังใช้เป็นการศึกษาควบคุมเพื่อตรวจหาพาหะของแบคทีเรียในกลุ่มผู้ป่วยพักฟื้นและติดตามติดตาม

งานใดๆ เหล่านี้ดำเนินการโดยใช้วิธีการที่ออกแบบมาเพื่อการแยกและการกำหนดปริมาณจุลินทรีย์ ขึ้นอยู่กับลักษณะของจุลินทรีย์จะใช้วิธีการทั้งหมดหรือบางส่วน

การส่องกล้องตรวจแบคทีเรียเป็นเทคนิคที่สามารถเข้าถึงได้มากที่สุด โดยอาศัยการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของวัสดุ เมื่อกล้องจุลทรรศน์การเตรียมอาหารสดคุณสามารถใช้ปฏิกิริยาจุลภาคเคมีบางอย่าง (เช่นการย้อมแบคทีเรียไอโอโดฟิลิกด้วยสารละลาย Lugol) หรือการเลือกการย้อมสีส่วนโครงสร้างต่าง ๆ ของแบคทีเรีย

แบคทีเรียสามารถระบุได้ชัดเจนยิ่งขึ้นในสารเตรียมที่มีสี วัสดุที่จะทดสอบถูกนำไปใช้กับสไลด์แก้วในชั้นที่บางและสม่ำเสมอที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้ ปล่อยให้ส่วนผสมผึ่งลมให้แห้งและแก้ไขโดยใช้วิธีใดวิธีหนึ่งที่เป็นที่ยอมรับโดยทั่วไป แต่ส่วนใหญ่มักโดยการเผา นั่นคือ ผ่านการปรุงอย่างรวดเร็วบนเปลวไฟของเตาสองหรือสามครั้งเพื่อให้แก้วอุ่น แต่ไม่ร้อน สารเตรียมที่เย็นลงหลังจากการตรึงจะถูกย้อมด้วยคราบธรรมดาหรือคราบต่าง ๆ (ดูการย้อมสีของจุลินทรีย์) สำหรับกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์จะใช้ทั้งการเตรียมแบบพื้นเมืองและแบบแห้ง ในกรณีนี้ การบำบัดด้วยสีย้อมบางชนิดจะทำให้โครงสร้างของร่างกายจุลินทรีย์หรือจุลินทรีย์ทั้งหมดเรืองแสงในรังสีอัลตราไวโอเลตหรือรังสีสีน้ำเงินสั้น ในการดัดแปลงอีกอย่างหนึ่ง จุลินทรีย์จะได้รับการบำบัดด้วยซีรัมเฉพาะที่มีป้ายกำกับด้วยฟลูออเรสเซนต์ (สีย้อม) แบคทีเรียที่ตรงกับซีรั่มจะเรืองแสงเมื่อมีซีรั่มที่มีป้ายกำกับติดอยู่ แบคทีเรียต่างชนิดกันจะไม่เรืองแสง

วิธีการตรวจแบคทีเรียใช้กันอย่างแพร่หลายในการวินิจฉัยทางแบคทีเรียของโรคติดเชื้อบางชนิด (โรคหนองใน, วัณโรค, ไข้กำเริบ) รวมถึงในการศึกษาความซับซ้อนทั้งหมดของจุลินทรีย์ในอวัยวะ (ต่อมทอนซิล, ช่องคลอด) ผลิตภัณฑ์หรือวัตถุอื่น ๆ

วิธีการหว่าน เช่น การแยกเชื้อบริสุทธิ์ของจุลินทรีย์ที่ต้องการออกไป เป็นวิธีการวินิจฉัยทางแบคทีเรียที่แม่นยำและเชื่อถือได้มากกว่าการส่องกล้องด้วยแบคทีเรีย วัสดุสดจะถูกกระจายไปทั่วพื้นผิวของสารอาหารที่มีความหนาแน่นสูงซึ่งเทลงในจานเพาะเชื้อ การเพาะขั้นต้นจะดำเนินการบนสื่อธรรมดาที่เหมาะกับจุลินทรีย์ที่กำหนดบนสื่อที่แตกต่างหรือคัดเลือก การเลือกสารอาหาร (ดู) รวมถึงวิธีการเตรียมวัสดุสดสำหรับการหว่านเบื้องต้นขึ้นอยู่กับระดับของการปนเปื้อนด้วยจุลินทรีย์จากต่างประเทศ ภายใน 24-48 ชม. เก็บไว้ในเทอร์โมสตัทที่อุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับจุลินทรีย์ที่กำหนด ถ้วยจะถูกตรวจสอบและโคโลนีที่น่าสงสัยจะถูกเพาะเลี้ยงย่อยบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่ส่งเสริมการแพร่กระจายของเชื้อโรคนี้ ด้วยวิธีนี้จะได้วัฒนธรรมของแบคทีเรียที่เป็นเนื้อเดียวกันซึ่งจะต้องระบุ

การจำแนกจุลินทรีย์เริ่มต้นด้วยการศึกษาสัณฐานวิทยาในการเตรียมสีและหยดแบบบด (ดู) เพื่อตรวจสอบรูปร่างของจุลินทรีย์และการเคลื่อนที่ของพวกมัน ขั้นต่อไปคือการศึกษาความสามารถของเอนไซม์ของแบคทีเรียในการสลายคาร์โบไฮเดรต กรดอะมิโน และยูเรียรวมกันเฉพาะสำหรับแต่ละประเภท ในแบคทีเรียจะมีการศึกษาเอนไซม์น้ำตาลและโปรตีโอไลติกมากที่สุด

การจำแนกจุลินทรีย์ต้องเสริมด้วยการศึกษาคุณสมบัติอื่น ๆ ของจุลินทรีย์แต่ละสกุลและชนิดของจุลินทรีย์ คุณสมบัติเหล่านี้รวมถึงความสามารถในการเลือกละลายเซลล์เม็ดเลือดแดงของสัตว์ต่าง ๆ (เม็ดเลือดแดงแตก), พลาสมาเลือดจับตัวเป็นก้อน (การแข็งตัวของพลาสมา), ละลายลิ่มเลือดไฟบริน (ละลายลิ่มเลือด) เป็นต้น คุณสมบัติทั้งหมดของแบคทีเรียเหล่านี้สามารถนำมาใช้ในการพิจารณาว่าเป็นคุณสมบัติที่แตกต่าง .

การบ่งชี้ขั้นสุดท้ายของจุลินทรีย์บางสายพันธุ์ ซึ่งส่วนใหญ่เป็นแบคทีเรียโคลิฟอร์มที่ทำให้เกิดโรค เกี่ยวข้องกับการระบุทางซีรัมวิทยา (ดูการจำแนกจุลินทรีย์) โดยปกติเพื่อจุดประสงค์นี้จะทำปฏิกิริยาการเกาะติดกันนั่นคือตรวจพบการรวมตัวกันของแบคทีเรียภายใต้อิทธิพลของซีรั่มภูมิคุ้มกันที่มีชื่อเดียวกัน การเกาะกันของจุลินทรีย์ในซีรั่มกับสปีชีส์หนึ่งๆ บ่งชี้ถึงความเป็นสมาชิกของสปีชีส์นั้น โดยปกติแล้ว ปฏิกิริยาการเกาะติดกันจะเกิดขึ้นบนแก้วโดยประมาณ และสำหรับการตรวจวัดขั้นสุดท้ายในหลอดทดลองที่มีการเจือจางในซีรั่ม

ไม่สามารถระบุจุลินทรีย์จำนวนหนึ่งได้ครบถ้วนตามที่อธิบายไว้ จากนั้น การระบุตัวตนจะต้องเสริมด้วยการติดเชื้อในสัตว์ทดลอง เนื่องจากแบคทีเรียบางชนิดมีลักษณะเฉพาะจากการทำให้เกิดโรคหรือความเป็นพิษ ซึ่งจะเปิดเผยเมื่อสัตว์ติดเชื้อ ในบางกรณี การติดเชื้อในสัตว์ยังทำหน้าที่เป็นวิธีการสะสมของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคอีกด้วย

มีเพียงการเปรียบเทียบคุณลักษณะทั้งหมดของวัฒนธรรมที่รวบรวมระหว่างการศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยา ชีวเคมี ซีรั่มวิทยา และคุณสมบัติทางชีวภาพ ในกรณีที่จำเป็นเท่านั้นที่สามารถให้เหตุผลในการจำแนกได้ คำตอบของผลการทดสอบที่เป็นบวกนั้นไม่ใช่เรื่องยากหากจุลินทรีย์ที่แยกได้นั้นเป็นเรื่องปกติ ในกรณีนี้ ให้ระบุประเภท ชนิด และชนิดของแบคทีเรีย (หากพิจารณาแล้ว) เมื่อจุลินทรีย์ถูกแยกออกซึ่งคุณสมบัติบางอย่างเบี่ยงเบนไปจากลักษณะทั่วไป จะมีคำตอบมาให้เพื่อระบุลักษณะเบี่ยงเบน ในกรณีนี้ จะเป็นประโยชน์หากต้องทำการศึกษาซ้ำหากสามารถดำเนินโรคหรือเงื่อนไขในการรวบรวมวัสดุได้ นอกจากนี้ยังเป็นประโยชน์ในการนำการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ผิดปกติไปศึกษาเพิ่มเติมโดยใช้วิธีการอื่นที่ซับซ้อนกว่า

ผลลัพธ์เชิงลบของการศึกษาทางแบคทีเรียมีความสำคัญสัมพัทธ์ และแสดงให้เห็นเพียงว่าส่วนที่ทดสอบของวัสดุไม่มีจุลินทรีย์ที่ต้องการหรือไม่สามารถใช้งานได้ อย่างไรก็ตามอาจมีอยู่ในส่วนอื่น ด้วยเหตุนี้ เมื่อตรวจการขนส่งแบคทีเรีย (ไข้ไทฟอยด์ โรคบิด คอตีบ) จำเป็นต้องมีการศึกษาซ้ำ

9971 0

การใช้วิธีการทางแบคทีเรียทำให้สามารถแยกเชื้อโรคในวัฒนธรรมบริสุทธิ์จากวัสดุที่ได้รับจากผู้ป่วยและระบุได้โดยอาศัยการศึกษาชุดคุณสมบัติ แบคทีเรียส่วนใหญ่มีความสามารถในการเพาะเลี้ยงบนอาหารเลี้ยงเชื้อเทียมหลายชนิด (ยกเว้นหนองในเทียมและริกเก็ตเซีย) ดังนั้นวิธีการทางแบคทีเรียจึงมีความสำคัญในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อหลายชนิด

หากได้รับผลลัพธ์ที่เป็นบวก วิธีการทางแบคทีเรียจะช่วยให้สามารถระบุความไวของเชื้อโรคที่แยกได้ต่อยาต้านจุลชีพ อย่างไรก็ตาม ประสิทธิผลของการศึกษาครั้งนี้ขึ้นอยู่กับหลายปัจจัย โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เงื่อนไขในการเก็บรวบรวมวัสดุและเขา การขนส่งไปที่ห้องปฏิบัติการ

ถึง ข้อกำหนดขั้นพื้นฐานข้อกำหนดสำหรับการเลือกและการขนส่งวัสดุสำหรับการวิจัยทางแบคทีเรีย ได้แก่:

• การรับประทานวัสดุก่อนเริ่มการรักษาแบบ etiotropic
• การปฏิบัติตามเงื่อนไขปลอดเชื้อเมื่อรวบรวมวัสดุ
• ความถูกต้องทางเทคนิคของการรวบรวมวัสดุ
• ปริมาณวัสดุที่เพียงพอ
• รับรองสภาวะอุณหภูมิสำหรับการจัดเก็บและขนส่งวัสดุ
• ลดช่วงเวลาระหว่างการรวบรวมวัสดุและการหว่านบนอาหารที่เป็นของแข็ง

ควรขนส่งวัสดุไปยังห้องปฏิบัติการโดยเร็วที่สุด แต่ไม่เกิน 1-2 ชั่วโมงหลังการรวบรวม ตัวอย่างวัสดุจะต้องเก็บไว้ที่อุณหภูมิที่กำหนด โดยเฉพาะอย่างยิ่ง วัสดุปลอดเชื้อตามปกติ (เลือด น้ำไขสันหลัง) จะถูกจัดเก็บและส่งไปยังห้องปฏิบัติการที่อุณหภูมิ 37 °C วัสดุที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ (ปัสสาวะ สารคัดหลั่งจากทางเดินหายใจ ฯลฯ) จะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องไม่เกิน 1-2 ชั่วโมงหรือไม่เกินหนึ่งวันที่ 4 °C (สภาวะในตู้เย็นในประเทศ) หากไม่สามารถส่งตัวอย่างไปยังห้องปฏิบัติการได้ภายในกรอบเวลาที่กำหนด ขอแนะนำให้ใช้สื่อการขนส่งที่ออกแบบมาเพื่อรักษาความมีชีวิตของเชื้อโรคภายใต้สภาวะการเก็บรักษา

เลือดสำหรับการวิจัยควรนำออกจากผู้ป่วยในช่วงที่อุณหภูมิร่างกายสูงขึ้นตั้งแต่เริ่มมีไข้ ขอแนะนำให้ตรวจสอบตัวอย่างเลือด 3-4 ตัวอย่างในช่วงเวลา 4-6 ชั่วโมงซึ่งเป็นธรรมจากมุมมองของการลดความเสี่ยงของแบคทีเรียที่ "หายไป" ชั่วคราวและเพิ่มความสามารถในการยืนยันบทบาททางสาเหตุของจุลินทรีย์ฉวยโอกาสที่แยกได้ จากเลือดหากตรวจพบจุลินทรีย์นี้ในตัวอย่างหลอดเลือดดำหลายตัวอย่าง เลือด ตัวอย่างเลือดในปริมาณ 10 มล. สำหรับผู้ใหญ่และ 5 มล. สำหรับเด็กจะถูกฉีดวัคซีนลงในขวดอย่างน้อยสองขวดโดยมีสื่อกลางสำหรับจุลินทรีย์แบบแอโรบิกและแบบไม่ใช้ออกซิเจนในอัตราส่วน 1:10 แนะนำให้ทำการศึกษาเลือดแดงเพียงครั้งเดียว

เอา น้ำไขสันหลัง(CSF) ผลิตโดยแพทย์ในระหว่างการเจาะเอวในปริมาณ 1-2 มล. ลงในหลอดฆ่าเชื้อแบบแห้ง ตัวอย่างจะถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการทันที ซึ่งการตรวจจะเริ่มต้นทันที หากไม่สามารถทำได้ วัสดุจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลาหลายชั่วโมง เพิ่มจำนวนผลบวกของการตรวจทางแบคทีเรียอย่างมีนัยสำคัญโดยการฉีด CSF 1-2 หยดลงในหลอดทดลองที่มีตัวกลางกึ่งของเหลวที่มีกลูโคส และลงในจานเพาะเชื้อที่มีวุ้น "เลือด" หากต้องการส่งวัสดุ ให้ใช้กล่องเก็บอุณหภูมิ แผ่นทำความร้อน กระติกน้ำร้อน หรือบรรจุภัณฑ์อื่นๆ ที่จะรักษาอุณหภูมิไว้ที่ประมาณ 37 °C

สิ่งขับถ่ายสำหรับการวิจัยทางแบคทีเรียวิทยา ให้ใช้ไม้พายไม้ปลอดเชื้อ 3-5 กรัมในภาชนะปลอดเชื้อที่มีฝาปิดแน่น การตรวจสอบวัสดุที่รวบรวมควรเริ่มภายใน 2 ชั่วโมงต่อมา หากไม่สามารถเริ่มการตรวจสอบได้ภายในเวลานี้ควรรวบรวมวัสดุจำนวนเล็กน้อยและวางไว้ในสื่อการขนส่งที่เหมาะสม เมื่อเก็บอุจจาระเราควรพยายามส่งสิ่งเจือปนทางพยาธิวิทยา (เมือก, หนอง, อนุภาคของเยื่อบุผิว ฯลฯ ) เพื่อตรวจดู (ถ้ามี) เพื่อหลีกเลี่ยงการนำสิ่งเจือปนในเลือดซึ่งมีคุณสมบัติในการฆ่าเชื้อแบคทีเรียเข้าไปในวัสดุ

สามารถใช้ไม้กวาดทางทวารหนัก (พร้อมปลายสำลี) เพื่อรวบรวมวัสดุ ควรชุบสำลีด้วยสารละลายไอโซโทนิกโซเดียมคลอไรด์หรือตัวกลางในการลำเลียงที่ปราศจากเชื้อ (แต่ไม่ใช่เจลน้ำมัน) มีการแนะนำต่อทวารหนักให้มีความลึก 5-6 ซม. และหมุนผ้าอนามัยแบบสอดแล้วเอาออกอย่างระมัดระวังเพื่อตรวจดูลักษณะของสีอุจจาระบนผ้าอนามัยแบบสอด ไม้พันจะถูกวางในหลอดทดลองแบบแห้งหากการศึกษาวัสดุเริ่มต้นภายใน 2 ชั่วโมง มิฉะนั้น - ในสื่อการขนส่ง

ฉันกำลังฉี่(ส่วนเฉลี่ยของปัสสาวะที่ปล่อยออกมาอย่างอิสระ) ในปริมาณ 3-5 มล. จะถูกรวบรวมในภาชนะที่ปลอดเชื้อหลังจากส้วมอวัยวะเพศภายนอกอย่างทั่วถึง ควรเก็บปัสสาวะในตอนเช้า

น้ำดีรวบรวมระหว่างการใส่ท่อช่วยหายใจในลำไส้เล็กส่วนต้นในห้องรักษาโดยแยกส่วน A, B และ C ออกเป็นหลอดปลอดเชื้อ 3 หลอด โดยปฏิบัติตามกฎของภาวะปลอดเชื้อ

น้ำล้างกระเพาะเก็บในขวดปลอดเชื้อในปริมาณ 20-50 มล. ควรระลึกไว้เสมอว่าในกรณีเหล่านี้การล้างกระเพาะอาหารจะดำเนินการเฉพาะกับสารละลายที่ไม่แยแส (ไม่มีฤทธิ์ฆ่าเชื้อแบคทีเรียหรือฆ่าเชื้อแบคทีเรียต่อจุลินทรีย์) เท่านั้น - โดยเฉพาะอย่างยิ่งน้ำต้ม (โดยไม่ต้องเติมโซดา, โพแทสเซียมเปอร์แมงกาเนต ฯลฯ )

เสมหะ- เสมหะในตอนเช้าที่ปล่อยออกมาระหว่างการไอจะถูกรวบรวมในขวดที่ปลอดเชื้อ ก่อนที่จะไอ ผู้ป่วยจะแปรงฟันและบ้วนปากด้วยน้ำต้มสุกเพื่อกำจัดเศษอาหาร เยื่อบุผิวที่ถูกทำลาย และจุลินทรีย์ในช่องปากออก

น้ำล้างหลอดลม- ในระหว่างการส่องกล้องหลอดลมจะฉีดสารละลายไอโซโทนิกโซเดียมคลอไรด์ไม่เกิน 5 มล. ตามด้วยการดูดเข้าไปในหลอดที่ปราศจากเชื้อ

มีน้ำมูกไหลออกจากคอหอย ปาก และจมูก- วัสดุจากช่องปากจะถูกนำมาในขณะท้องว่างหรือ 2 ชั่วโมงหลังอาหารด้วยสำลีหรือช้อนที่ผ่านการฆ่าเชื้อจากเยื่อเมือกและบริเวณที่ได้รับผลกระทบที่ทางเข้าท่อของต่อมน้ำลายพื้นผิวของลิ้นและ จากแผลพุพอง หากมีฟิล์มให้ถอดออกด้วยแหนบฆ่าเชื้อ วัสดุจากโพรงจมูกนั้นถูกนำมาด้วยสำลีก้านแห้งที่ผ่านการฆ่าเชื้อซึ่งสอดลึกเข้าไปในโพรงจมูก วัสดุจากช่องจมูกจะถูกนำมาด้วยสำลีก้านคอหอยด้านหลังที่ผ่านการฆ่าเชื้อ ซึ่งสอดอย่างระมัดระวังผ่านช่องจมูกเข้าไปในช่องจมูก หากเริ่มมีอาการไอ ผ้าอนามัยแบบสอดจะไม่ถูกถอดออกจนกว่าอาการไอจะหมดลง ในการตรวจหาโรคคอตีบ จะมีการตรวจฟิล์มและน้ำมูกจากจมูกและลำคอไปพร้อมๆ กัน โดยใช้สำลีที่แตกต่างกัน

วัสดุทดสอบจะถูกฉีดลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่เป็นของแข็งโดยใช้เทคนิคพิเศษเพื่อให้ได้การเจริญเติบโตของจุลินทรีย์แต่ละโคโลนี จากนั้นจึงคัดแยกออกเพื่อแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์ของเชื้อโรค

แบคทีเรียบางชนิดถูกแยกโดยใช้สื่อคัดเลือกที่ยับยั้งการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์แปลกปลอมหรือมีสารที่กระตุ้นการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคบางชนิด

จุลินทรีย์ที่แยกได้จากอาหารเลี้ยงเชื้อ แยกแยะ, เช่น. กำหนดชนิดหรือประเภทของพวกมัน เมื่อเร็วๆ นี้ เพื่อระบุตัวตนในการปฏิบัติงานด้านการดูแลสุขภาพ มีการใช้ระบบไมโครเทสต์ ซึ่งเป็นแผงที่มีชุดสภาพแวดล้อมในการวินิจฉัยแยกโรค ซึ่งจะช่วยเร่งการวิจัยให้เร็วขึ้น ระบบไมโครเทสต์ยังใช้เพื่อตรวจสอบความไวของจุลินทรีย์ต่อยาต้านจุลชีพโดยการเจือจางยาปฏิชีวนะในตัวกลางที่เป็นสารอาหารเหลว

เมื่อประเมินผลการศึกษาทางแบคทีเรียวิทยาแพทย์จะต้องคำนึงว่าผลลัพธ์เชิงลบไม่ได้หมายความว่าไม่มีเชื้อโรคเสมอไปและอาจเกี่ยวข้องกับการใช้ยาต้านจุลชีพกิจกรรมของจุลินทรีย์ในเลือดสูงและข้อผิดพลาดทางเทคนิค การตรวจหาจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในวัสดุจากผู้ป่วย โดยไม่คำนึงถึงภาพทางคลินิก เป็นไปได้ในกรณีของการพักฟื้น การมีสุขภาพดี หรือการขนส่งแบคทีเรียชั่วคราว

การแยกเชื้อออกจากเลือดภายใต้กฎปลอดเชื้อของจุลินทรีย์ฉวยโอกาส (staphylococcus epidermidis, Escherichia coli) และแม้แต่ saprophytes ก็ควรพิจารณาถึงการรวมตัวของแบคทีเรียในเลือด โดยเฉพาะอย่างยิ่งหากพบจุลินทรีย์เหล่านี้ในตัวอย่างวัสดุมากกว่าหนึ่งตัวอย่างหรือในสารตั้งต้นที่แตกต่างกัน ( เลือด, ปัสสาวะ) เนื่องจากจุลินทรีย์เหล่านี้และจุลินทรีย์ที่ "ไม่ก่อโรค" เหล่านี้และจุลินทรีย์ที่ "ไม่ก่อโรค" อื่น ๆ อาจเป็นสาเหตุของกระบวนการติดเชื้อได้โดยการลดการตอบสนองภูมิคุ้มกันของร่างกาย ซึ่งรวมถึงภาวะติดเชื้อด้วย

มีปัญหาบางอย่าง การตีความผลการตรวจทางแบคทีเรียของอาหารที่ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อกล่าวคือ การพิสูจน์บทบาททางสาเหตุของจุลินทรีย์ฉวยโอกาส ในกรณีนี้ให้คำนึงถึงตัวบ่งชี้เช่นประเภทของวัฒนธรรมที่แยกได้จำนวนเซลล์จุลินทรีย์ในประเภทที่กำหนดในวัสดุการแยกซ้ำระหว่างการเกิดโรคการมีอยู่ของการปลูกพืชเชิงเดี่ยวหรือการเชื่อมโยงของจุลินทรีย์

Yushchuk N.D. , Vengerov Yu.Ya.