การตรวจเลือดโดยใช้วิธีถอดรหัสแบบ Ifa ความสำคัญของการทดสอบแอนติบอดี IgG, IgM, IgA ในการวินิจฉัยการติดเชื้อ

เทคนิคการวินิจฉัยสมัยใหม่ทำให้สามารถระบุโรคเฉพาะในห้องปฏิบัติการโดยใช้การทดสอบพิเศษ หนึ่งในนั้นคือการตรวจเลือดด้วยเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับอิมมูโนซอร์เบนท์ ซึ่งสามารถยืนยันการวินิจฉัยที่ทำไว้ก่อนหน้านี้ได้

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ ELISA เป็นหนึ่งในวิธีการที่มีประสิทธิภาพและทันสมัยที่สุดในการระบุความผิดปกติที่เกี่ยวข้องกับความไม่สมดุลของภูมิคุ้มกันและฮอร์โมน รวมถึงกระบวนการทางเนื้องอก ในระหว่างการทดสอบ แอนติบอดีที่ผลิตขึ้นเมื่อมีการติดเชื้อในร่างกายสามารถตรวจพบได้ในเลือด เมื่อคำนึงถึงความแตกต่างนี้แล้ว โรคนี้สามารถตรวจพบได้แม้ในระยะแรกของการพัฒนา

พื้นฐานของเทคนิคคืออะไร?

ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ ELISA ขึ้นอยู่กับการได้รับปฏิกิริยาทางเคมีต่อเอนไซม์ ซึ่งทำหน้าที่เป็นเครื่องหมายระบุพิเศษสำหรับการจดจำแอนติบอดี ดังนั้นในระหว่างปฏิกิริยาอิมมูโนเคมี แอนติบอดีเริ่มมีปฏิกิริยากับแอนติเจนบางชนิด ทั้งหมดนี้ให้เหตุผลในการยืนยันว่าผลการบริจาคเลือดให้กับ ELISA นั้นมีน้อยมาก

การศึกษานี้ช่วยให้คุณทราบจำนวนเซลล์ภูมิคุ้มกัน คุณสมบัติของเซลล์ ตลอดจนการมีอยู่ของแอนติบอดีที่จำเป็น

ผลลัพธ์จะถือว่าเป็นบวกเมื่อตรวจพบสีของสารละลาย สีบ่งบอกว่าแอนติเจนกำลังทำปฏิกิริยากับแอนติบอดี หากไม่มีอะไรเช่นนี้เกิดขึ้น ผลลัพธ์จะเป็นลบ

เมื่อตรวจพบโรคเอชไอวีในบุคคลจะมีการวินิจฉัยตามลำดับหลายครั้งโดยมีอัลกอริธึมการดำเนินการที่แตกต่างกัน วิธีที่ใช้ในการวินิจฉัยตั้งแต่เริ่มต้นคือ HIV ELISA นี่คือการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ซึ่งจะตรวจจับการตอบสนองของร่างกายต่อไวรัส

ในช่วงสี่สัปดาห์แรก ปริมาณไวรัสในร่างกายไม่เพียงพอต่อการตอบสนอง ดังนั้นเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ จะต้องตรวจเอชไอวีครั้งแรกในสัปดาห์ที่ 6 ภายหลังการติดเชื้อ

ELISA ดำเนินการได้ 3 วิธี ได้แก่ การตรวจเลือดโดยตรง วิธีทางอ้อม และวิธีการ "แซนวิช" ความน่าจะเป็นของการวินิจฉัยโรคเอดส์คือประมาณ 97% หากตรวจพบโปรตีนที่ตอบสนองต่อไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ในตัวอย่างเลือด แสดงว่าเป็นโรคนั้น วิธีนี้ช่วยให้คุณเห็นประเภทของไวรัส ดังนั้นคุณจึงสามารถเลือกการรักษาที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นและรักษาสุขภาพของมนุษย์ได้

ในรูปคือชุดตรวจวินิจฉัย

ด้วยการพัฒนาทางวิทยาศาสตร์ วิธีการวิเคราะห์จึงมีการปรับปรุงอย่างต่อเนื่อง ต้องใช้เลือดน้อยลงเรื่อยๆ และผลลัพธ์ก็แม่นยำมากขึ้นเรื่อยๆ ปัจจุบันมีการใช้การทดสอบ ELISA รุ่นที่ 4 สำหรับเอชไอวี ความน่าเชื่อถือของวิธีนี้สูงกว่าตัวเลือกก่อนหน้าอย่างมาก

การทดสอบ HIV รุ่นที่ 4 ช่วยให้คุณสามารถแยกโปรตีนการตอบสนองออกเป็นกลุ่มและระบุความจำเพาะของไวรัสได้

นอกจาก ELISA แล้ว ยังมีการใช้ตัวเลือกการทดสอบอีกหลายรายการ:

• PCR เชิงคุณภาพ;
• PCR เชิงปริมาณ;
• ภูมิคุ้มกันบกพร่อง;

ไม่อาจกล่าวได้อย่างชัดเจนว่า PCR หรือ ELISA ไม่สามารถดีกว่านี้ได้ เนื่องจากวิธีการที่แตกต่างกันจะมีประสิทธิภาพในช่วงเวลาที่ไวรัสทำงานต่างกัน ตามกฎแล้วจะมีการดำเนินการตัวเลือกการทดสอบทั้งหมดเพื่อให้คำตัดสินที่เชื่อถือได้

สำคัญ! หากคลินิกเอกชนเสนอให้ตรวจเอชไอวีรุ่นที่ 5 หรือ 6 ที่มีราคาแพงแต่แม่นยำมาก คุณไม่ควรเชื่อเลย ปัจจุบันมีเพียง ELISA รุ่นที่ 4 เท่านั้นที่ได้รับการพัฒนาและใช้งานอยู่ ควรทำการวิเคราะห์ที่หน่วยงานของรัฐที่ได้รับใบอนุญาตจะดีกว่า

บ่อยครั้งในระหว่างการตรวจพบว่าผู้ติดเชื้อ HIV มีโรคร่วม: chlamydia cytomegalovirus, ซิฟิลิส, ทริโคโมแนส ฯลฯ สิ่งมีชีวิตเหล่านี้อาจมีส่วนทำให้เกิดการวินิจฉัยผิดพลาด ดังนั้นจึงต้องตรวจ HIV ซ้ำหลังการรักษา

ELISA จะดำเนินการเมื่อใด?

วงจรการพัฒนาไวรัสมีหลายขั้นตอน:

• ระยะฟักตัว;
• ระยะเวลาของการติดเชื้อเฉียบพลัน
• ระยะเวลาแฝง
• ระยะของโรคทุติยภูมิ

ในระยะแรก การตอบสนองจะไม่เกิดขึ้น หรือความรุนแรงของมันต่ำมากจนตัวบ่งชี้ไม่สามารถบันทึกได้ ไม่แนะนำให้ทำการวิเคราะห์ในเวลานี้

ช่วงที่สองจะเริ่มประมาณ 6 สัปดาห์หลังการติดเชื้อ ช่วงนี้เป็นช่วงที่มีการตรวจสอบเบื้องต้น

เมื่อทำการวิเคราะห์สิ่งสำคัญคือต้องคำนึงถึงลักษณะเฉพาะของสิ่งมีชีวิตด้วย ดังนั้นเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ ให้ทำการทดสอบซ้ำหลังจาก 12 สัปดาห์ (หลังจาก 3 เดือน) และหลังจาก 6 เดือน

หากการทดสอบเป็นบวกในช่วงเวลาทั้งหมดหรือบางส่วน จะมีการกำหนดการทดสอบเอชไอวีอีกครั้ง (อิมมูโนล็อตติง) ควรแสดงระดับการพัฒนาของโรคและลักษณะเฉพาะของโรค

สำคัญ! หากคุณผลการตรวจ HIV เป็นลบหลังจากผ่านไปสองสามสัปดาห์หรือหลายเดือน ไม่ได้หมายความว่าจะไม่มีไวรัสอีกต่อไป การวิเคราะห์อาจเกิดขึ้นพร้อมกับช่วงกรอบเวลา ในกรณีนี้ไม่สามารถหยุดการรักษาและติดตามการพัฒนาของโรคได้

แม้ว่าวิธีการที่ใช้จะมีความแม่นยำสูง แต่การวิเคราะห์อาจมีข้อผิดพลาดเนื่องจาก:

• การฆ่าเชื้อเครื่องมือแพทย์ไม่ดี
• ข้อผิดพลาดของบุคลากรในห้องปฏิบัติการ
• การเตรียมผู้ป่วยเพื่อการบริจาคโลหิตที่ไม่เหมาะสม
• การสอบเทียบเครื่องมือไม่ถูกต้อง ฯลฯ

เพื่อการวิเคราะห์ที่เหมาะสม ช่วงเวลาในการศึกษาที่ถูกต้องเป็นสิ่งสำคัญ

การเตรียมตัวสำหรับ ELISA

อุปกรณ์ที่ทำงานเกี่ยวกับเลือดนั้นไวต่อส่วนประกอบต่างๆ ที่เกี่ยวข้อง สารบางชนิดในเลือดอาจทำให้อุปกรณ์ขัดข้องและให้ผลลัพธ์ที่ไม่ถูกต้อง ดังนั้นก่อนเข้ารับการตรวจ HIV จึงต้องเตรียมตัวก่อน

เมื่อดำเนินการ ELISA บุคคลจะต้องปฏิบัติตามกฎเกณฑ์ทั้งหมดในการเตรียมตัวสำหรับการบริจาคโลหิตเป็นประจำ:

• ก่อนการวิเคราะห์ อย่ากินอาหารที่มีไขมันหรือหวาน
• ห้ามสูบบุหรี่ 12 ชั่วโมงก่อนการทดสอบ
• อย่าออกกำลังกายมากเกินไปในร่างกาย
• หากงานเกี่ยวข้องกับอันตรายจากสารเคมี ก็คุ้มค่าที่จะสละเวลาออกไป
• อย่ารับประทานยาสองวันก่อนการทดสอบ

จะตรวจเอชไอวีได้ที่ไหน

ในประเทศของเรา สถาบันการแพทย์เกือบทุกแห่งมีอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการสำหรับการวิเคราะห์เอชไอวี ในการตรวจสอบสถานะของคุณ เพียงติดต่อนักบำบัดและส่งต่อเพื่อทำการตรวจ

มีโครงการตรวจเอชไอวีทั่วประเทศซึ่งมีการวินิจฉัยโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ในห้องปฏิบัติการเคลื่อนที่ หากต้องการเช็คอินกับพวกเขาก็เพียงพอแล้วที่จะมีหนังสือเดินทางและความปรารถนา

หากบุคคลใดรู้สึกเขินอายที่ต้องไปโรงพยาบาล การทดสอบสามารถทำได้ที่บ้าน แต่ความแม่นยำของอุปกรณ์ดังกล่าวต่ำมาก

รูปแบบการทดสอบ

ในระหว่างการวิเคราะห์ เลือดส่วนหนึ่งจะถูกใส่ในเครื่องมือพิเศษและบำบัดด้วยการเตรียมอิมมูโนเอ็นไซม์ สิ่งนี้ควรส่งเสริมการปล่อยโปรตีน p15, p17, p24, p31 หลังจากช่วงระยะเวลาหนึ่ง เซรั่มจะถูกวางลงในอุปกรณ์ที่บันทึกการมีอยู่ของเซลล์ภูมิคุ้มกัน

การตรวจเอชไอวีจะดำเนินการอย่างเคร่งครัดในขณะท้องว่าง

ELISA ไม่ได้ตรวจพบแอนติเจนของไวรัส แต่ตรวจพบแอนติบอดีต่อไวรัส วิธีนี้จะแม่นยำกว่าเพราะในกรณีแรกอาจเกิดปฏิกิริยากับไวรัสตัวอื่นในร่างกายได้

การถอดรหัสผลลัพธ์ ELISA

หลังการตรวจเลือดเพื่อหาเชื้อ HIV คุณอาจได้รับผลลัพธ์ที่เป็นไปได้หลายประการ:

• เชิงบวก;
• เชิงลบ;
• ผลบวกลวง;
• ลบเท็จ;
• น่าสงสัย.

หากการทดสอบเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์สำหรับเอชไอวีเป็นบวก แสดงว่าบุคคลนั้นเป็นโรค ผลการทดสอบอื่นๆ ทั้งหมดหมายความว่าการทดสอบจำเป็นต้องทำซ้ำหรือทำซ้ำเนื่องจากผลลัพธ์ไม่ถูกต้อง

ความถูกต้องของผลการตรวจภูมิคุ้มกันบกพร่องขึ้นอยู่กับ:

• การสอบเทียบอุปกรณ์ที่ถูกต้อง
• การฆ่าเชื้ออุปกรณ์อย่างเหมาะสม
• การเตรียมผู้ป่วยเพื่อการวิเคราะห์
• การปฏิบัติตามการกระทำของบุคลากรด้วยเทคนิคการวิเคราะห์

หากการตอบสนองของภูมิคุ้มกันอ่อนแอ ผลลัพธ์ที่ได้จะเป็นที่น่าสงสัย ซึ่งหมายความว่ามีไวรัส แต่มีปริมาณน้อยเกินไป ซึ่งอาจเป็นผลมาจากการทำความสะอาดอุปกรณ์ที่ไม่ดีจากการศึกษาครั้งก่อน ในกรณีนี้ ให้ทำการทดสอบซ้ำ

สำคัญ! มีเพียงวิธี ELISA เท่านั้นที่สามารถแสดงสาเหตุการเสียชีวิตจากเชื้อ HIV ได้ เนื่องจากโปรตีนยังอยู่ในร่างกาย ไวรัสจะตายอย่างรวดเร็วเมื่อโฮสต์ตาย ดังนั้นวิธีการวินิจฉัยอื่นจึงไม่ทำงาน

หากผลการทดสอบ ELISA เป็นบวก

เมื่อบุคคลได้รับการทดสอบ ELISA ในเชิงบวกสำหรับเอชไอวี พวกเขาควรติดต่อแพทย์ทันที มีเพียงแพทย์ผู้เชี่ยวชาญเท่านั้นที่สามารถตัดสินขั้นสุดท้ายว่ามีการติดเชื้อเอชไอวีหรือไม่ โดยอาศัยการศึกษาที่แม่นยำ ในทุกกรณีที่ผล ELISA เป็นบวก จะมีการกำหนดการทดสอบ PCR ซ้ำเพื่อระบุปริมาณไวรัส จากชุดข้อมูล แพทย์จะสรุปเกี่ยวกับความเร็วของโรคและลักษณะของการพัฒนาของไวรัส

คำแนะนำ! คุณไม่สามารถละทิ้งการตรวจเพิ่มเติมเมื่อผลบวกครั้งแรก บางครั้งผลลัพธ์นี้เกิดจากการเตรียมและดำเนินการทดสอบที่ไม่เหมาะสม

จะทำอย่างไรถ้า ELISA เป็นบวก

ผลลัพธ์ของ ELISA จะถือว่าเชื่อถือได้หลังจากการวิเคราะห์และยืนยันผลลัพธ์ซ้ำแล้วซ้ำอีกเท่านั้น

หากคุณได้รับการทดสอบในเชิงบวก คุณควรปรึกษาแพทย์ของคุณ หากมีการทดสอบเพียงรายการเดียวเท่านั้นที่เป็นบวก ควรทำการวิเคราะห์ซ้ำหลังจากผ่านไปสองสามสัปดาห์เพื่อให้ได้ข้อมูลที่เชื่อถือได้

สาเหตุของผลลัพธ์ที่ผิดพลาดอาจเป็นรอยเลือดจากการทดสอบครั้งก่อน

ภาวะแทรกซ้อนระหว่างการทดสอบ

โรคต่างๆ มากมายอาจทำให้ได้รับข้อมูลที่ไม่ถูกต้อง:

ความเบี่ยงเบนด้านสุขภาพดังกล่าวไม่อนุญาตให้ตรวจพบร่องรอยไวรัสโดย ELISA ผู้ป่วยจะได้รับการวินิจฉัยประเภทอื่น

จะทำอย่างไรถ้าผลลัพธ์เป็นลบ

อย่าลืมว่ากำหนดเวลาในการทำการทดสอบอาจตกในช่วงหน้าต่างซีโรเนกาทีฟเมื่อกิจกรรมของไวรัสลดลงและตรวจไม่พบ เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ จำเป็นต้องทำการวิเคราะห์ซ้ำหลังจากผ่านไปสองสามสัปดาห์

คุณไม่สามารถนำเลือดของคุณเองมาวิเคราะห์ได้ เนื่องจากโปรตีนที่ ELISA ตรวจพบจะสลายตัวอย่างรวดเร็ว ซึ่งจะส่งผลให้ได้รับผลลัพธ์เชิงลบ

วิธีหนึ่งในการตรวจจับเซลล์ไวรัสในช่วงเวลาดังกล่าวคือ PCR ก่อนการวิเคราะห์นี้ จะทำปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ซึ่งจะเพิ่มจำนวนส่วนของ RNA ซึ่งจะทำให้สามารถเข้าถึงยาเพื่อการวิเคราะห์ได้มากขึ้น

การตั้งครรภ์และ ELISA

เพื่อหลีกเลี่ยงการติดเชื้อในแนวตั้งของทารกในครรภ์จากแม่ที่ติดเชื้อ ผู้หญิงทุกคนในระหว่างตั้งครรภ์จะต้องได้รับการตรวจ ELISA สำหรับเอชไอวี การเจาะเลือดตั้งแต่เนิ่นๆ ของการตั้งครรภ์ร่วมกับการทดสอบอื่นๆ ในบางกรณี หากผลลัพธ์ไม่เป็นที่น่าสงสัย หรือหากผู้หญิงติดต่อกับคู่ครองที่ติดเชื้อ HIV อยู่ตลอดเวลา การสังเกตจะดำเนินการตลอดการตั้งครรภ์

หากตรวจพบเชื้อเอชไอวีในผู้หญิงผ่านการทดสอบ จะมีการทดสอบซ้ำในห้องปฏิบัติการ

หากผลลัพธ์เชื่อถือได้ ผู้หญิงคนนั้นจะได้รับการรักษาด้วยยาต้านไวรัสแบบเบา ๆ เพื่อป้องกันการติดเชื้อของทารกในครรภ์

สำคัญ! หากตรวจพบเชื้อเอชไอวีในสตรีระหว่างตั้งครรภ์ ไม่ได้หมายความว่าเด็กจะได้รับการรับรองว่าติดเชื้อเอชไอวี ด้วยการปรึกษาหารือกับแพทย์อย่างทันท่วงที การใช้ยาอย่างเหมาะสม และการติดตามอย่างต่อเนื่อง เด็กจะเกิดมามีสุขภาพที่ดี สุขภาพของเด็กส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับพฤติกรรมความสามารถของแม่!

การรักษา

ผู้ที่มีสถานะติดเชื้อ HIV ไม่ควรรักษาตัวเอง โรคนี้มักเกิดขึ้นเฉพาะบุคคลและขึ้นอยู่กับวิธีการติดเชื้อ การทำงานของไวรัส ระบบภูมิคุ้มกันของมนุษย์ และปัจจัยอื่นๆ อีกมากมาย การรักษาขึ้นอยู่กับระยะของเชื้อเอชไอวี มีเพียงแพทย์เท่านั้นที่สามารถสั่งการรักษาที่เหมาะสมได้

มีการตรวจสอบระยะของโรคและระดับการตอบสนองต่อยาในระหว่างการทดสอบซ้ำ สิ่งสำคัญคือต้องผ่านการทดสอบดังกล่าว เนื่องจากลักษณะเฉพาะของแต่ละบุคคล การรักษาอาจไม่ได้ผลซึ่งจะนำไปสู่การพัฒนาของโรคและความเสื่อมโทรมของความเป็นอยู่ที่ดีของผู้ป่วย

รายการมาตรการวินิจฉัยมาตรฐานที่ใช้สำหรับโรคติดเชื้อ ได้แก่ เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ หาก ELISA เป็นผลบวกต่อซิฟิลิส อย่าเพิ่งตื่นตระหนกทันที

เรามาดูคุณสมบัติของเทคนิคการวิจัยนี้และหลักการตีความผลลัพธ์ที่ได้รับในผู้ป่วยประเภทต่างๆ กันดีกว่า

เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์เป็นหนึ่งในวิธีการที่ใช้กันทั่วไปในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อ มันอยู่ในหมวดหมู่ของการทดสอบ treponemal นั่นคือสามารถใช้เพื่อระบุการมีอยู่ของสาเหตุของซิฟิลิส - treponema pallidum ในร่างกายของผู้ป่วย

ด้วยวิธี ELISA จะตรวจพบซิฟิลิสโดยการตรวจหาแอนติบอดีต่อ Treponema มีอยู่ในเลือดของผู้ป่วย ชนิดและปริมาณขึ้นอยู่กับระยะและรูปแบบของโรค ซึ่งช่วยให้สามารถรับข้อมูลที่สำคัญเกี่ยวกับสถานะปัจจุบันของสุขภาพของมนุษย์ได้

ข้อดีและข้อเสีย

ELISA มักถูกกำหนดไว้สำหรับผู้ที่สงสัยว่าเป็นซิฟิลิสหรือโรคติดเชื้ออื่นๆ เนื่องจากการวิเคราะห์ช่วยให้เราสามารถระบุชนิดและระยะของโรคได้อย่างแน่นอน และความน่าเชื่อถือยังคงอยู่ในระดับสูง - ความน่าจะเป็นของข้อผิดพลาดจากผลการศึกษาหลายรายการมีเพียง 1% ซึ่งเป็น ELISA หลัก มีความแม่นยำประมาณ 90%

การใช้รีเอเจนต์คุณภาพสูงและอุปกรณ์ที่ทันสมัยช่วยให้เราเพิ่มความแม่นยำของตัวบ่งชี้ได้สูงสุด

โดยทั่วไปข้อดีของวิธีนี้คือ:

1. ผลลัพธ์มีความแม่นยำสูง. โอกาสที่จะได้รับข้อมูลเท็จมีน้อยมาก
2. ลดปัจจัยอิทธิพลของมนุษย์ให้เหลือน้อยที่สุดอุปกรณ์ที่ทันสมัยสำหรับการดำเนินการ ELISA ช่วยลดอิทธิพลของมนุษย์ต่อผลการศึกษาเนื่องจากกระบวนการอัตโนมัติ
3. การจำแนกแอนติบอดีจำเพาะ. เป็นไปไม่ได้ที่จะสร้างความสับสนระหว่างแอนติเจนประเภทหนึ่งกับชนิดอื่นดังนั้นการวิเคราะห์จึงแสดงผลลัพธ์ที่แน่นอนสำหรับการวินิจฉัยเฉพาะ
4. บันทึกการเบี่ยงเบนเล็กน้อยจากบรรทัดฐาน. แม้แต่สารทางพยาธิวิทยาที่มีความเข้มข้นน้อยที่สุดก็ไม่มีใครสังเกตเห็น

เราไม่ควรลืมจุดอ่อนของวิธีนี้ ELISA มีข้อเสียดังต่อไปนี้:

1. ราคาสูง. ต้นทุนที่สูงนั้นเกิดจากหลายปัจจัย โดยเฉพาะอย่างยิ่งความต้องการอุปกรณ์ที่ดี รีเอเจนต์คุณภาพสูง และผู้เชี่ยวชาญที่มีระดับการฝึกอบรมที่เพียงพอ
2. ความจำเป็นในการวินิจฉัยเบื้องต้น คุณจำเป็นต้องรู้ว่าต้องค้นหาแอนติเจนตัวใด เนื่องจากหากไม่มีข้อมูลเพิ่มเติม การวินิจฉัยที่แม่นยำจึงเป็นไปไม่ได้
3. ความน่าจะเป็นของผลลัพธ์บวกลวง สภาพร่างกายบางอย่างและปัจจัยอื่น ๆ อาจบิดเบือนข้อมูลสุดท้าย

บ่งชี้ในการใช้งาน

แพทย์อาจสั่งจ่ายเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์เพื่อวินิจฉัยไม่เพียงแต่ซิฟิลิสเท่านั้น แต่ยังรวมถึงโรคติดเชื้ออื่นๆ อีกจำนวนหนึ่งด้วย

หากเราพิจารณาสถานการณ์โดยตรงกับการติดเชื้อ Treponema เหตุผลในการตรวจอาจเป็น:

• การปรากฏตัวของอาการภายนอกของโรค (แผลริมอ่อน, ผื่นซิฟิลิส, เหงือก ฯลฯ );
• ภูมิคุ้มกันลดลงอย่างมีนัยสำคัญ
• การตรวจพบหรือสงสัยโรคซิฟิลิสในคู่นอน คนที่คุณรัก และสมาชิกในครอบครัว
• ปฏิกิริยาเชิงบวกระหว่างการทดสอบอื่น
• ระบุโรคอื่น ๆ ที่อาจเกี่ยวข้องกับซิฟิลิส
• ความปรารถนาส่วนตัวของบุคคลที่จะเข้าสอบ

วิธีการดำเนินการ

ELISA สามารถทำได้หลายวิธี ในแต่ละกรณีจะมีการเลือกตัวเลือกที่เหมาะสมที่สุด

ก่อนอื่นจะแบ่งวิธีการออกเป็น:

1. เชิงคุณภาพ ตรวจพบการติดเชื้อหรือไวรัสในร่างกายของผู้ป่วย
2. เชิงปริมาณ กำหนดความเข้มข้นของแอนติบอดีต่อสารก่อโรคในร่างกายมนุษย์ซึ่งระบุระยะและความรุนแรงของการพัฒนาของโรค

นอกจากนี้ยังมีการจำแนกวิธีการดำเนินการ ELISA ตามหลักการของการจำลองปฏิกิริยาที่ต้องการ

มี 3 ตัวเลือก:

1. ตรง. แอนติบอดีที่มีฉลากจะถูกฉีดเข้าไปในตัวอย่างเลือดที่จัดให้
2. ทางอ้อมกับแอนติเจนแอนติเจนที่ถูกดูดซับจะถูกวางไว้ในเซลล์ของแผ่นโพลีสไตรีนที่ใช้สำหรับ ELISA ก่อน จากนั้นจะมีการเติมแอนติบอดีของไวรัสซึ่งกระตุ้นการก่อตัวของภูมิคุ้มกันเชิงซ้อนที่จำเป็นสำหรับการประเมินผลลัพธ์เพิ่มเติม
3. ทางอ้อมกับแอนติบอดีวิธีนี้มักใช้กับโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ มันเกี่ยวข้องกับการดูดซึมแอนติบอดีเบื้องต้นจากนั้นจึงเพิ่มแอนติเจนลงในแท็บเล็ตเท่านั้น

กฎการรวบรวมวัสดุ

เพื่อลดความเสี่ยงในการได้รับผลลัพธ์ที่ไม่น่าเชื่อถือจำเป็นต้องบริจาคเลือดเพื่อการวิเคราะห์อย่างถูกต้อง

ก่อนที่จะทำการทดสอบ ELISA คุณต้องปฏิบัติตามข้อจำกัดบางประการ:

• หลีกเลี่ยงความเครียดทางร่างกายและอารมณ์ที่รุนแรง
• หยุดสูบบุหรี่และดื่มแอลกอฮอล์อย่างน้อย 1-3 วัน
• คุณต้องเปลี่ยนไปใช้โภชนาการที่เหมาะสมสักสองสามวัน
• ขอแนะนำให้ผู้หญิงควบคุมระยะของรอบประจำเดือนเนื่องจากฮอร์โมนสามารถบิดเบือนผลลัพธ์ได้
• มื้อสุดท้ายควรเป็นเวลา 8-10 ชั่วโมงก่อนการบริจาคโลหิต
• ไม่รวม 10 วันก่อนรับประทานยาที่อาจส่งผลต่อผลการศึกษา

สำหรับ ELISA นั้น เลือดดำจะถูกนำออกจากหลอดเลือดดำท่อนใน โดยจะต้องบริจาคในตอนเช้าขณะท้องว่าง โดยทั่วไปจะใช้กฎมาตรฐานในการเตรียมการเก็บตัวอย่างเลือดจากหลอดเลือดดำ อาจมีการแนะนำข้อกำหนดเพิ่มเติมสำหรับการเตรียมเบื้องต้นของผู้ป่วยทั้งนี้ขึ้นอยู่กับการมีอยู่ของโรคที่กำลังทดสอบ

ระเบียบวิธี

คำแนะนำในการดำเนินการ ELISA นั้นค่อนข้างง่าย:

1. เลือดของผู้ป่วยถูกนำมาจากหลอดเลือดดำ
2. วัสดุที่นำมาจะถูกเตรียมและแบ่งออกเป็นตัวอย่างบนพาเลทตาข่ายละเอียดพิเศษ
3. แอนติเจนผสมกับแอนติบอดีตามวิธีที่เลือก
4. ประเมินปฏิกิริยา ตัวอย่างจะถูกเปรียบเทียบกับตัวอย่างควบคุม และผลลัพธ์จะได้รับการประเมินทั้งในเชิงคุณภาพและเชิงปริมาณ
5. ข้อมูลจะถูกป้อนลงในตารางพิเศษพร้อมตัวบ่งชี้เชิงปริมาณที่แนบมา (แอนติบอดีทั้งหมด)
6. แพทย์ที่เข้ารับการรักษาจะตีความผลลัพธ์ หากจำเป็นให้ทำการรักษาอย่างเหมาะสม

หลังการตรวจผู้ป่วยจะได้รับเอกสารพร้อมผลการตรวจ ดูเหมือนตารางที่มีสัญลักษณ์ตรงกันตรงข้ามกับอิมมูโนโกลบูลินแต่ละประเภทที่จุดตัดกับชื่อโรคติดเชื้อ

การถอดรหัส

มีเพียงผู้เชี่ยวชาญเท่านั้นที่สามารถถอดรหัสผลการทดสอบได้อย่างถูกต้อง เป็นการยากที่จะเข้าใจด้วยตัวเองว่าผลลัพธ์ของ ELISA k = 1 4 หมายถึงอะไร ซิฟิลิสยังสามารถเกิดขึ้นได้ในรูปแบบต่าง ๆ ซึ่งสะท้อนให้เห็นในข้อมูลสุดท้ายด้วย

ผลลัพธ์ระบุอิมมูโนโกลบูลิน 3 ประเภท:

1. ไอจีเอ็ม. ช่วยให้คุณกำหนดระยะเวลาของการติดเชื้อซิฟิลิสได้ ผลบวกบ่งบอกถึงการกำเริบของโรค การขาดหายไปอาจบ่งบอกถึงการบรรเทาอาการของโรคเรื้อรังหรือรูปแบบที่แฝงเร้นของโรค
2. ไอจีเอบ่งบอกถึงโรคที่ติดเชื้อมานานกว่าหนึ่งเดือนแล้ว นอกจากนี้ยังเป็นสัญญาณของระยะเฉียบพลันของโรคทั้งในโรคทั่วไปและโรคเรื้อรังขั้นสูง
3. ไอจีจี. เป็นสัญญาณของระยะสูงสุดของโรคนั่นคือการกำเริบของโรค สำหรับซิฟิลิสปฏิกิริยาเชิงบวกจะปรากฏขึ้นในช่วงหลังการรักษา ในโรคบางประเภทอาจเป็นสัญญาณของภูมิคุ้มกันที่พัฒนาแล้ว

สารเหล่านี้ผลิตโดยร่างกายในลำดับที่แน่นอนซึ่งเป็นสัญญาณเพิ่มเติมของโรค การทดสอบเชิงคุณภาพจะระบุการมีอยู่ของอิมมูโนโกลบูลินในเลือดของแต่ละประเภทเท่านั้น

ซึ่งสะท้อนให้เห็นจากการเปลี่ยนแปลงสีของวัสดุที่เกี่ยวข้องกับการวิเคราะห์ ตัวบ่งชี้เชิงปริมาณเป็นตัวช่วยซึ่งอธิบายสถานการณ์ได้แม่นยำยิ่งขึ้น อัตราส่วนของแอนติเจนและแอนติบอดีบ่งบอกถึงความรุนแรงของโรคและความรุนแรงของการตอบสนองของร่างกาย

จะทำอย่างไร

หากผู้ป่วยเป็นโรคซิฟิลิสจริงๆ ELISA เชิงบวกจะถูกตรวจพบเสมอ เป็นไปไม่ได้ที่จะไม่สังเกตเห็นการมีอยู่ของ Treponemes ในระหว่างการศึกษาดังกล่าว อย่าสิ้นหวัง โรคนี้รักษาได้สูงโดยเฉพาะในระยะเริ่มแรก

จะทำอย่างไรถ้าผลการทดสอบเป็นบวก:

• ตามข้อบ่งชี้ของแพทย์ ให้เข้ารับการตรวจเพิ่มเติม
• สำเร็จหลักสูตรการรักษาด้วยยาปฏิชีวนะตามระบบการปกครองที่เลือก
• มุ่งเน้นความพยายามของคุณในการเสริมสร้างระบบภูมิคุ้มกันของคุณ
• แจ้งคู่นอนของคุณเกี่ยวกับโรคนี้
• ในอนาคต ให้เข้ารับการวินิจฉัยเชิงป้องกันอย่างสม่ำเสมอจนกว่าจะถอนการลงทะเบียนที่ร้านขายยา (หลังจาก 5 ปีหากไม่มีผลการทดสอบเป็นบวก)

ไม่ต้องเลื่อนการลาป่วยและกลัวที่จะประกาศผล การวินิจฉัยจะถูกเข้ารหัสและยังคงเป็นความลับ เฉพาะในกรณีที่มีการคุกคามต่อการติดเชื้อต่อผู้อื่น จำเป็นต้องแจ้งให้ญาติและคู่นอนทราบถึงปัญหาเพื่อให้พวกเขาได้รับการตรวจที่จำเป็น

ผลบวกลวงและสาเหตุ

บางครั้งผลลัพธ์ของการทดสอบอื่นๆ และ ELISA จะถูกบันทึกว่าเป็นผลบวกลวงสำหรับซิฟิลิส นั่นคือเหตุผลที่แนะนำให้ใช้วิธีการเสริม 2 - 3 วิธีและทำซ้ำเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์หลังจากผ่านไประยะหนึ่ง

ความไม่ถูกต้องดังกล่าวเกิดขึ้นได้ยาก โดยมีสาเหตุหลักมาจากปัจจัยต่อไปนี้:

• การตั้งครรภ์;
• โรคเรื้อรัง;
• การฉีดวัคซีนล่าสุด
• การบาดเจ็บ

ผลลัพธ์เชิงบวกเท็จแบ่งออกเป็นแบบเฉียบพลันและเรื้อรัง ขึ้นอยู่กับลักษณะของปัจจัยที่กระตุ้นให้เกิด

รายการหลักแสดงอยู่ในตาราง:

หากคุณมีปัญหาสุขภาพดังกล่าว การตรวจซิฟิลิสอาจให้ผลเป็นบวก แต่นี่เป็นเพียงผลจากการที่ร่างกายผลิตโปรตีนเพื่อต่อสู้กับโรคเท่านั้น อย่างไรก็ตาม ELISA ยอมรับว่าพวกมันเป็นแอนติเจน

ในเด็กที่มีสุขภาพดีอายุไม่เกินหนึ่งปีครึ่ง อาจสังเกตผลบวกลวงของ ELISA หากผู้หญิงติดเชื้อซิฟิลิสในระหว่างตั้งครรภ์ ก่อนวัยนี้ เลือดยังไม่มีเวลาที่จะต่ออายุได้อย่างสมบูรณ์ ดังนั้น แอนติบอดีของมารดาจึงอาจปรากฏอยู่ในเลือดนั้น ข้อยกเว้นคือสถานการณ์ที่มีการตรวจพบอิมมูโนโกลบูลิน IgM

คุณสามารถดูข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับคุณสมบัติของเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์และวิธีการนำไปใช้ได้โดยดูวิดีโอในบทความนี้

การตรวจเลือดด้วยเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์เป็นวิธีการทั่วไปในการระบุโรคต่างๆ ผลการตรวจเลือด การตีความแบบ ELISA ซึ่งแปลโดยแพทย์วินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการ มีความน่าเชื่อถือในกรณีส่วนใหญ่

เอลิซ่าคืออะไร

ELISA เป็นวิธีการวินิจฉัยสมัยใหม่ที่ใช้ในการวินิจฉัยการติดเชื้อ ความผิดปกติของฮอร์โมนและภูมิคุ้มกัน และมะเร็งในห้องปฏิบัติการ วิธีนี้ช่วยให้คุณตรวจหาแอนติบอดีต่อการติดเชื้อในระยะแรกของโรควิธีนี้เป็นของวิธีการวินิจฉัยทางอ้อมเนื่องจากเผยให้เห็นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกาย ข้อดีของ ELISA เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีการวินิจฉัยอื่น ๆ คือความสามารถในการผลิตในระดับสูงซึ่งช่วยลดโอกาสที่จะเกิดข้อผิดพลาด วิธีนี้มีความไวสูงและใช้ในการวินิจฉัยโรคทั้งในเด็กและผู้ใหญ่ มีการแก้ไข ELISA ที่หลากหลาย

วิธี ELISA ขึ้นอยู่กับความจำเพาะของปฏิกิริยาอิมมูโนเคมี เช่นเดียวกับรูปแบบเคมีกายภาพของปฏิกิริยาของสารเชิงซ้อนแอนติเจน-แอนติบอดี ปฏิกิริยาจะดำเนินการโดยการมีส่วนร่วมของเอนไซม์จำเพาะซึ่งเป็นเครื่องหมายในการตรวจหาแอนติบอดี อันเป็นผลมาจากปฏิกิริยาทางอิมมูโนเคมี แอนติบอดีที่กำหนดไว้อย่างเคร่งครัดจะจับกับแอนติเจนที่เกี่ยวข้อง การตรวจเลือดโดยใช้เอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์เกือบจะช่วยลดโอกาสที่จะได้ผลลัพธ์ที่ผิดพลาด ผู้เชี่ยวชาญด้านการวินิจฉัยในห้องปฏิบัติการจะตัดสินผลลัพธ์ที่เป็นบวกหรือลบโดยพิจารณาจากว่าสารละลายนั้นมีสีหรือไม่ในระหว่างการบ่งชี้ทางเอนไซม์ของสารเชิงซ้อนของแอนติเจน-แอนติบอดี ถ้าสารละลายเปลี่ยนเป็นสี แอนติเจนจะมีปฏิกิริยากับแอนติบอดี ผลลัพธ์ของ ELISA จะเป็นค่าบวก

ELISA สามารถตรวจพบโรคอะไรบ้าง?

การวิจัยโดยใช้เอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ช่วยให้:

• ระบุโรคติดเชื้อจำนวนหนึ่ง
• วินิจฉัยโรคแพ้ภูมิตัวเอง
• ตรวจจับการปรากฏตัวของเนื้องอก;
• กำหนดความผิดปกติของฮอร์โมน
• ดำเนินการวิจัยอื่น ๆ

การตรวจเลือดโดยใช้วิธี ELISA ช่วยให้คุณระบุการติดเชื้อต่อไปนี้:

วิธีการนี้ใช้เพื่อระบุแอนติเจนของเชื้อโรคในการติดเชื้อจำนวนหนึ่งรวมทั้งระบุแอนติบอดีในประเภทต่างๆ วิธี ELISA ได้รับความนิยมอย่างมากในการตรวจหาซิฟิลิส เอชไอวี และไวรัสตับอักเสบ ไม่แนะนำให้ระบุสถานะและระดับของแอนติบอดีในเลือดเพื่อวัตถุประสงค์ในการวินิจฉัยเบื้องต้นของโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์ ในกรณีนี้การมีอยู่ของแอนติบอดีในเลือดอาจเป็นเพียงสัญญาณว่าร่างกายของผู้ป่วยเคยสัมผัสกับเชื้อโรคในอดีตเท่านั้น

การวินิจฉัยโรคภูมิต้านตนเองต่างๆ โดยใช้ ELISA ดำเนินการโดยการตรวจ:

• ร่างกายต่อต้านนิวเคลียร์
• แอนติบอดีต่อ DNA ที่มีเกลียวคู่
• แอนติบอดีต่อแอนติเจนนิวเคลียร์ที่ละลายน้ำได้ (หน้าจอ ENA);
• แอนติบอดีต่อต้านคาร์ดิโอลิพิน;
• IgG ถึงเปปไทด์ citrullinated;
• ปัจจัยไขข้ออักเสบ
• โปรตีนซีปฏิกิริยา
• แอนติบอดีอัตโนมัติต่อนิวโทรฟิลไซโตพลาสซึมแอนติเจน (หน้าจอ ANCA)

คอมเพล็กซ์ภูมิคุ้มกันจำเพาะเป็นลักษณะของโรคแพ้ภูมิตัวเองบางชนิด ตัวอย่างเช่น แอนติบอดี DNA สายคู่เป็นคุณลักษณะเฉพาะของโรค เช่น โรคลูปัส erythematosus ทั่วร่างกาย

มะเร็งถูกกำหนดโดยเอนไซม์อิมมูโนแอสเสย์ของซีรั่มในเลือดสำหรับตัวบ่งชี้มะเร็งที่จำเพาะ เช่น PSA, CA-125

PSA บ่งชี้ว่ามีเนื้องอกต่อมลูกหมากและมะเร็งต่อมลูกหมาก CA-125 เป็นตัวบ่งชี้มะเร็งสำหรับมะเร็งรังไข่ มูลค่ายังเพิ่มขึ้นตามเนื้องอกมะเร็งของมดลูก ต่อมน้ำนม และเยื่อบุโพรงมดลูก

การเตรียมการวิเคราะห์

เพื่อให้ผลลัพธ์มีความถูกต้องแม่นยำสูงสุด คุณต้องปฏิบัติตามกฎเกณฑ์บางประการในการเตรียมตัวสำหรับการศึกษา การวิเคราะห์เพื่อวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการโดยใช้วิธี ELISA มักจะดำเนินการในตอนเช้าจากหลอดเลือดดำฝากครรภ์ จำเป็นต้องบริจาคเลือดอย่างเคร่งครัดในขณะท้องว่าง นอกจากคำแนะนำง่ายๆ นี้แล้ว ควรปฏิบัติตามคำแนะนำในการเตรียมการต่อไปนี้:

• 24 ชั่วโมงก่อนการทดสอบจำเป็นต้องหลีกเลี่ยงการดื่มแอลกอฮอล์และการสูบบุหรี่
• หลีกเลี่ยงการออกกำลังกายหนัก
• อยู่ในสภาพสงบ
• หลีกเลี่ยงความตึงเครียดทางประสาท
• บริจาคเลือดให้กับ ELISA ไม่ช้ากว่า 10 วันหลังจากหยุดยา
• แจ้งแพทย์ของคุณเกี่ยวกับการใช้ยาที่จำเป็น

นอกจากนี้ก่อนการทดสอบสองสามวันก่อนแนะนำให้รับประทานอาหาร ในเวลาเดียวกันให้แยกอาหารที่มีไขมันและอาหารทอดออกจากอาหาร ก่อนที่จะตรวจหาเชื้อไวรัสตับอักเสบ ให้แยกอาหารออกไม่เพียงแต่อาหารที่มีไขมันและอาหารทอดเท่านั้น แต่ยังรวมถึงผลไม้รสเปรี้ยวและผักสีส้มด้วย

ควรสังเกตว่าผลลัพธ์ของการศึกษาฮอร์โมนบางช่วงนั้นได้รับอิทธิพลจากปัจจัยต่างๆ เช่น ระยะของรอบประจำเดือน ความจำเป็นในการทดสอบในช่วงหนึ่งของรอบประจำเดือนควรปรึกษากับแพทย์ของคุณล่วงหน้า มิฉะนั้นคุณอาจได้รับผลลัพธ์ที่ไม่คาดคิด ตัวอย่างเช่น ระดับปกติของฮอร์โมนเพศลูทีไนซ์ในผู้หญิงจะแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับวันของรอบเดือน:

• 1-12 วัน - 2-14 น้ำผึ้ง/ลิตร;
• 12-14 วัน - 24-150 mU/l;
• ตั้งแต่วันที่ 15 ก่อนเริ่มรอบใหม่ - 2-17 mU/l

การถอดรหัสผลลัพธ์ ELISA

การวิเคราะห์ช่วยให้เราสามารถระบุการมีอยู่ของแอนติบอดีประเภทต่างๆ ในร่างกายได้ แอนติบอดีมี 3 ประเภท:

การผลิตแอนติบอดีเหล่านี้เกิดขึ้นในระยะต่างๆ ของโรค แอนติบอดี IgM เป็นแอนติบอดีชนิดแรกที่ผลิตในร่างกายหลังการติดเชื้อ การปรากฏตัวของพวกเขาเป็นตัวบ่งชี้ของโรคไม่ว่าในกรณีใด แอนติบอดีประเภทนี้ไม่มีอยู่ในร่างกายของคนที่มีสุขภาพแข็งแรง

อิมมูโนโกลบูลินเหล่านี้จะอยู่ในซีรั่มในเลือดประมาณ 5-6 สัปดาห์

อิมมูโนโกลบูลินคลาส G ในเลือดบ่งชี้ว่าบุคคลนั้นเป็นโรคนี้แล้วหรือเป็นพาหะของการติดเชื้อ แอนติบอดีเหล่านี้เริ่มผลิตขึ้นหลังจากแอนติบอดีคลาส M ในโรคส่วนใหญ่ 3-4 สัปดาห์หลังการติดเชื้อ การมีอยู่ในร่างกายเป็นไปได้หลายปี และในบางโรค (เช่น ซิฟิลิส) จะมี IgG อยู่ในเลือดตลอดชีวิต

หากมี IgA อยู่ในร่างกาย ก็จำเป็นต้องต่อสู้กับการติดเชื้ออย่างเข้มข้นที่สุด แอนติบอดีประเภทนี้จะปรากฏเฉพาะในกรณีของโรคติดเชื้อเรื้อรังเท่านั้น การหายไปของ IgA บ่งชี้ถึงการทำลายของการติดเชื้อ

หากทำการทดสอบ ELISA ในเด็กอายุต่ำกว่า 1.5 ปี ต้องคำนึงถึงคุณสมบัติต่อไปนี้: เลือดของเด็กมี IgG ของแม่สำหรับการติดเชื้อต่างๆ นี่ไม่ได้หมายความว่าเด็กป่วย ในกรณีนี้นี่ค่อนข้างจะเป็นบรรทัดฐาน การปรากฏตัวของ IgM เป็นหลักฐานของการติดเชื้อในมดลูกหรือการติดเชื้อที่เกิดขึ้นหลังคลอด IgM ของแม่ไม่สามารถเข้าสู่ร่างกายของทารกผ่านทางรกได้

ตารางแสดงการผสมผสานที่เป็นไปได้ของการมีอยู่หรือไม่มีแอนติบอดีของ 3 คลาสในร่างกายและการตีความ

เมื่อการทดสอบการถอดรหัส (+) บ่งชี้ถึงผลลัพธ์ที่เป็นบวก และ (-) บ่งชี้ถึงสิ่งที่ตรงกันข้าม นั่นคือลบ ผลลัพธ์ที่แสดงการมีหรือไม่มีสารในร่างกายเรียกว่าเชิงคุณภาพ สามารถเสริมเป็นปริมาณได้ ผลลัพธ์เชิงปริมาณสะท้อนถึงปริมาณของสารต่างๆ ในร่างกาย

เป็นที่น่าสังเกตว่าระบบทดสอบมีค่าอ้างอิงของตัวเองซึ่งกำหนดโดยผู้ผลิตซึ่งเป็นลักษณะของตัวบ่งชี้ ตามกฎแล้วการเกินค่าอ้างอิงหมายถึงการมีอยู่ของโรคบางอย่างในร่างกายของผู้ทดสอบ

หลังจากได้รับผล ELISA แล้ว ค่าที่ได้รับควรถูกถอดรหัสโดยแพทย์ที่เข้ารับการรักษา มีเพียงเขาเท่านั้นที่สามารถประเมินผลลัพธ์ที่ได้รับและกำหนดระยะของโรคได้อย่างถูกต้อง

ติดต่อกับ